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目的:低剂量阿糖胞苷(low-dose cytarabine,LDAC)联合DNA去甲基化或诱导分化药物,例如维生素D化合物,是针对无法耐受高强度化疗的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者的潜在治疗方案。本课题拟探索对LDAC联合1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-D3)方案高度敏感的AML亚型,以及联合用药抗白血病效应的潜在机制。方法:下载cBioPortal数据库中AML样本(n=179)的转录组测序数据和临床信息,利用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验明确VDR基因表达量与AML患者生存期的相关性,并用非参数检验比较不同FAB分型患者之间VDR基因的表达差异。通过RT-qPCR和Western Blot验证不同FAB分型的AML细胞系和原代细胞中VDR基因和蛋白的表达规律。利用1,25-D3处理上述AML细胞,通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)、免疫荧光法和Western Blot检测处理前后髓系分化抗原CD11b和CD14的表达量变化。选取适宜浓度的Ara-C与1,25-D3组成联合方案,CCK-8法检测各类AML细胞中空白对照组、单药处理组和联合用药组的细胞活力,同时利用FCM检测各药物处理组的CD11b和CD14阳性表达率、细胞周期和细胞凋亡率。RT-qPCR和Western Blot检测各组p21、p27基因和蛋白的表达量。结果:(1)VDR高表达样本(n=44)的中位总体生存期和中位无事件生存期显著短于VDR低表达样本(n=44)(P<0.05)。(2)急性单核细胞白血病(FAB-M5,n=21)和急性粒-单核细胞白血病(FAB-M4,n=36)样本的VDR基因表达量显著高于其他FAB分型(P<0.001);单核AML细胞系U937和MOLM-13的VDR基因和蛋白表达量高于非单核AML细胞系KG1a和K562(P<0.001);FAB-M5来源原代细胞(n=2)的VDR基因表达量亦高于FAB-M2来源原代细胞(n=1)。(3)经过10 nmol/L的1,25-D3处理72h后,单核AML细胞系U937、MOLM-13和THP-1的CD11b和CD14表达量显著增加,而非单核AML细胞系KG1a和K562无明显变化;(4)相比单药处理,10 nmol/L的1,25-D3联合100 nmol/L的Ara-C更为显著地抑制U937、MOLM-13和THP-1的细胞活力(P<0.05),并显著上调三种细胞的CD11b和CD14表达量(P<0.05);但联合用药对KG1a、K562细胞和正常间充质干细胞无类似作用。(5)相比单药处理,联合用药诱导U937细胞发生更为显著的G0/G1期阻滞(P<0.05),并显著上调p21、p27基因和蛋白的表达量(P<0.05);但对细胞凋亡影响较小。结论:1,25-D3可以增强LDAC对急性单核白血病细胞的生长抑制、分化诱导和周期阻滞作用,其机制可能与联合用药上调p21和p27的表达有关。