据世界卫生组织颁布的《全球癌症报告2014》显示,肝癌在全世界的发病率呈高速增加趋向,其中中国的肝癌新增病例和死亡人数均居世界第一位。肝癌,是指肝脏内细胞的恶性过度生长,包括“原发性肝癌”和“转移性肝癌”两种,“原发性肝癌”是临床上较常见的恶性肿瘤之一,在我国约占80%以上。治疗肝癌的方法除手术治疗以外,主要是放射治疗和化学治疗。由于化疗药物具有费用高昂、毒副作用大和有耐药性等缺点,所以从天然植物药材中寻找低毒高效、提高机体免疫力、无耐药性的新型生物调节剂或药物前体成为当前医药领域的研究热点。马齿苋(Portulaca oleracea L.)是药食两用植物,马齿苋多糖(Portulaca oleracea L.Polysaccharides,POP)是马齿苋的主要活性成分之一。目前关于POP的分离、提取、抗氧化、抗糖尿病等功效的研究报道较多,对POP具有抗癌作用已经有少量的研究报道,但POP对人肝癌细胞株HepG2抗肿瘤的分子作用机制研究还未见报道。本研究在课题组前期分离提取马齿苋的基础工作上,采用酶法进行脱蛋白工艺优化研究,进一步纯化POP和初步的结构解析,并从细胞分子水平研究POP的抗肝癌功能及其分子作用机制。1、木瓜蛋白酶法除POP中蛋白的最佳响应面优化条件:酶液与糖液的体积比0.2:1,时间3.03 h,温度62.45℃,PH 5.98,多糖中平均蛋白去除率为78.4%。2、采用高效凝胶色谱法分离得到两种POP主要组分(POP-A和POP-B),得到POP-A和POP-B的分子量分别为11kD和9.1kD;采用PMP柱前衍生化高效液相色谱法得知,POP-A的单糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成;红外色谱法分析得POP-A中单糖组成主要为吡喃糖,且α-半缩醛羟基和β-半缩醛羟基两种糖苷构型共存。3、POP-A对人肝癌细胞株HepG2的影响及抗肿瘤作用的分子机理研究。结果显示,与对照组相比,分别用1.25 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/m L的POP-A处理肝癌细胞(HepG2 cells)24 h和48 h,能明显抑制HepG2细胞的增殖。其作用机制可能与POP-A调节细胞的免疫反应和调控细胞内p53、Bax和Bcl-2等基因与蛋白质的表达有关。本论文从马齿苋多糖的脱蛋白工艺优化,精制多糖的结构解析,精制多糖抗癌效果及其抗肝癌作用的分子机理等方面进行了较为系统的研究。为进一步从天然产物中开发具有抗癌作用的新型生物调节剂或药物前体提供了科学的理论参考。