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植物在遭受外界胁迫时,体内会积累大量的活性氧,高水平的活性氧若得不到及时的清除,则会对植物造成伤害.抗坏血酸过氧化物酶(APX)是植物体内重要的活性氧清除酶类,该酶主要依靠 AsA-GSH循环清除植物体内过量的H2O2,从而增强植物对外界胁迫的抵抗能力.本文通过设计741毛白杨apx的cDNA保守区反义序列,构建反义表达载体,得到含有目的基因片段的转基因烟草,探究反义表达apx-I和apx-IX对烟草抗逆(干旱、高盐及氧化胁迫)能力的影响.主要研究结果如下: 1、构建了8种 PBI121-apx反义表达载体,并将表达载体成功转入农杆菌LBA4404中,分别利用带有目的基因片段的农杆菌浸染烟草叶片,以20mg/L的Kan作为选择压筛选不定芽,获得具有Kan抗性的再生植株. 2、为了进一步检测再生烟草植株,对得到的抗性苗进行PCR检测及GUS组织化学染色,证明已成功获得8种反义表达apx基因烟草. 3、在干旱胁迫下,转基因植株较野生型植株更早的出现叶片萎蔫及枯黄,转基因植株含水量较野生型下降更为显著,反义表达植株体内APX活性较低，H2O2含量明显升高,膜透性亦明显增加.测定结果显示,反义表达apx-I和apx-IX增强了烟草对干旱胁迫的敏感性。 4、apx-I和apx-IX的反义表达限制了盐胁迫条件下转基因植株体内APX的活性,经2周盐处理后,转反义基因植株体内H2O2含量显著或极显著高于野生型,同时转基因植株的相对电导率、MDA含量明显升高,而叶绿素含量则明显降低.与野生型烟草相比,反义表达apx-I和apx-IX导致烟草抗盐性减弱. 5、在甲基紫精诱导的氧化胁迫下,转基因烟草体内的APX活性与野生型相比升高并不显著,而转基因植株的SOD活性和H2O2含量则显著或极显著升高,同时其叶绿素含量降低,MDA含量明显增加.表明在氧化胁迫下,转基因植株较野生型植株受到了更大程度的伤害.