高产麦芽低聚糖酒曲根霉的选育及其主要淀粉降解产物研究

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根霉由于高产淀粉酶系常用于淀粉类制品的发酵,在甜酒曲中是主要的糖化菌,为了提高甜酒中功能性麦芽低聚糖的含量,本文对根霉的多种淀粉酶进行了全面研究,并研究了其淀粉酶系与麦芽低聚糖产量的关系,筛选出产麦芽低聚糖较高的菌株,并对其进行诱变,对诱变菌株的淀粉酶进行了分离纯化并研究了其淀粉降解性质。本论文主要包括以下五个方面的内容: 1 从市售酒曲中通过分离纯化得到根霉RN-1,根霉RA-1,根霉RS-1,根霉RQ-1,与传统Q303比较具有较高的液化酶和糖化酶产生能力,且具有较高的麦芽低聚糖酶活力。其中用根霉RA-1制作的甜酒汁液中麦芽低聚糖含量最高。 2 采用亚硝酸和紫外线处理对根霉RA-1进行了人工诱变,得到一株低聚糖酶活力较高的菌株根霉RA-UV4,酶活力达到4360u/g(干曲),提高到出发菌株的403.7%;液化酶提高到出发菌株的486.2%,达到1953.2u/g(干曲),糖化酶提高到出发菌株的567.8%,达到2.55×105u/g(干曲),将该菌株进行斜面传代,产酶稳定。 3 对根霉RA-UV4淀粉酶进行了分离纯化,经过(NH42SO4分步沉淀,DEAE-纤维素离子交换层析和葡聚糖凝胶G-100(Sephadex G-100)层析等3部纯化,得到了电泳纯的糖化酶和2种在电泳中迁移距离相近的液化型淀粉酶,其相对分子质量分别为78000D,48000D,50000D。 4 用根霉RA-UV4制做甜酒,对甜酒汁液中的糖分进行了Sephadex G-100凝胶层析分离,得到葡萄糖、二糖、三糖组分。测定甜酒汁液中水溶性总糖含量达到355.43g/kg(干糯米),还原糖达到305.21g/kg(干糯米),麦芽低聚糖值为14.13%,麦芽低聚糖含量为50.21g/kg(干糯米),提高到根霉RA-1的105.9%。其中三糖含量约为25.43g/kg(干糯米),提高到出发菌株的119.1%。
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