1型糖尿病与HLA-DRB1基因频率的关联研究

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目的探讨HLA-DRB1基因频率与1型糖尿病的关联,寻找山西地区1型糖尿病患者HLA-DRB1位点的易感基因和保护基因,从而为研究1型糖尿病的病因及其发病机制提供理论依据。材料和方法选取30例1型糖尿病患者及30例汉族健康人DNA。采用聚合酶链反应序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SS0)方法,对30例1型糖尿病(T1DM)患者标本DNA和30例对照标本DNA的HLA-DR1基因进行分型。并选择低分辨分型有显著差异的患者和健康对照者DNA,对其HLA-DRB1等位基因再进行高分辨分型。结果首先,T1DM组中,低分辨分型共检出12种HLA-DRB1等位基因分别为DRB1*01、DRB1*03、DRB1*04.DRB1*07、DRB1*08、DRB1*09、DRB1*11、DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15、DRB1*16,基因频率范围是1.67%-21.67%,其中DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09、DRB1*12等位基因的频率较高,分别为16.67%、23.33%、21.67%、13.33%,而DRB1*01、DRB1*13、DRB1*16等位基因的频率较低,均为1.67%。对照组中,低分辨分型共检出13种HLA-DRB1等位基因分别为DRB1*01、DRB1*03、DRB1*04、DRB1*07、DRB1*08、DRB1*09、DRB1*10、DRB1*11、DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15、DRB1*16,基因频率范围为1.67%-16.67%,其中DRB1*12、DRB1*13、DRB1*14、DRB1*15等位基因的频率较高,分别为15%、10%、10%、16.67%。DRB1*03、DRB1*10、DRB1*16等位基因的频率较低,分别为3.33%、1.67%、1.67%。T1DM组中DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.05),其基因频率高于对照组,即DRB1*03(16.67%VS 3.33%,P=0.015);DRB1*04(23.33%VS 8.33%,P=0.024);DRB1*09(21.67%VS 8.33%,P=0.041)。因此DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09与T1DM成正相关,为T1DM的易感基因。而DRB1*15与正常对照比较也有显著差异,其频率低于对照组,即DRB1*15(5%VS 16.67%,P=0.040),DRB1*15与T1DM成负相关,为T1DM的保护基因。T1DM中HLA-DRB1杂合子基因DR3/DR4、DR3/DR9.与正常对照比较差异无显著性。其次,对低分辨分型有显著差异(DRB1*03、DRB1*04、DRB1*09、DRB1*15)的患者和健康对照者DNA,进行的HLA-DRB1等位基因高分辨分型中发现:T1DM患者组中,10例患者的DRB1*03中,检出1种高分辨型基因,为DRB1*03:01。14例患者的DRB1*04中共检出4种高分辨基因型:即DRB1*04:05基因(9例),频率为15%; DRB1*04:04基因(2例),频率为3.33%; DRB1*04:03基因(1例),频率为1.67%; DRB1*04:01基因(2例),频率为3.33%。其中DRB1*04:05频率比较高,DRB1*04:04, DRB1*04:03, DRB1*04:01基因频率比较低。13例DRB1*09中检出1种高分辨型基因DRB1*09:01。3例DRB1*15中检出1种高分辨基因为DRB1*15:01。对照组中,2例对照者的DRB1*03中检出1种高分辨型基因为DRB1*03:01。5例对照者的DRB1*04中共检出2种高分辨型基因:即DRB1*04:06基因(4例),频率为6.67%; DRB1*04:05 (1例),基因频率为1.67%。5例对照者的DRB1*09中检出1种高分辨基因为DRB1*09:01.10例对照者的DRB1*15中检出1种高分辨型基因为DRB1*15:01基因。T1DM组中,DRB1*03:01、DRB1*04:05、DRB1*09:01与正常对照比较有显著差异(P<0.05),其基因频率高于对照组:DRB1*03:01(16.67% VS 3.33%, P=0.015); DRB1*04:05 (15% VS 1.67%, P=0.008); DRB1*09:01 (21.67% VS 8.33%, P=0.041)。DRB1*03:01、DRB1*04:05、DRB1*09:01与T1DM成正相关,为T1DM的易感基因。DRB1*15:01与正常对照比较有显著差异(P<0.05),其基因频率低于对照组(5%VS 16.67%,P=0.040),为T1DM的保护基因。结论本研究采用了PCR-SSO法对DRB1进行分型。分型到DRB1基因后的第4位是本研究的特点之一。发现DRB1*03:01、DRB1*04:05、DRB1*09:01为T1DM的易感基因,DRB1*15:01为T1DM的保护基因。并且首次报道DRB1*04:05为T1DM的易感基因。从而为研究1型糖尿病的病因及其发病机制提供理论依据。
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