【摘 要】
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目的:脂肪干细胞是目前骨组织工程研究中的一种重要种子细胞。直接冻存作为骨组织工程用的细胞/支架复合物,显得尤为重要。目前,玻璃化冻存是冻存细胞/支架复合物的最有前景
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目的:脂肪干细胞是目前骨组织工程研究中的一种重要种子细胞。直接冻存作为骨组织工程用的细胞/支架复合物,显得尤为重要。目前,玻璃化冻存是冻存细胞/支架复合物的最有前景的冻存方法之一。因而,开发出一种由海藻糖和二甲基亚砜为主要组分的新型的、有效的冻存液,对保存细胞/支架复合物显得尤为重要。希望通过改善冻存液的组成和预处理条件来增强对脂肪干细胞/支架复合物的玻璃样冻存的效果。方法:首先制备出由人脂肪干细胞与脱钙骨结合形成组织工程骨。经过1周的成骨诱导后,进行玻璃化冻存。在冻存的1周后,对冻存的脂肪干细胞/支架复合物进行常规复苏。观察复苏后第3天的细胞成活率,成骨基因ALP,OCN的表达,并运用多响应优化分析法,确定海藻糖和二甲基亚砜的最佳配比。结果:新开发的玻璃化冻存液的最优组成是:二甲基亚砜(v/v)30%,海藻糖0.8molL-1,LG-DMEM(v/v)70%。结论:基于以上结果分析,采用二甲亚砜/海藻糖/LG-DMEM这种新型的冻存液来玻璃化冻存脂肪干细胞/脱钙骨支架复合物,可实现为骨组织工程提供大量即用型的细胞/支架复合物的目的
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