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目的:探讨人子宫内膜间充质干细胞(human endometrial stromal stem cells,h EMSCs)治疗小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)的疗效以及相关作用机制,为急性肝衰竭提供新的治疗思路。方法:1.116只C57小鼠饲养在屏障环境中,随机分为空白对照组(CCl4溶剂Oil组)和CCl4致ALF模型组。模型组进一步分为PBS组(细胞溶剂对照)、EMSC组、BMSC组(目前临床试验常用细胞作为阳性对照)四组,每组29只。模型组小鼠腹腔注射50%体积分数的CCl4(CCl4与橄榄油体积比1:1)建立C57小鼠急性肝衰竭模型,剂量为4 ml/kg;Oil组接受等体积CCl4溶剂橄榄油注射。在腹腔注射后4h,PBS组每只小鼠通过尾静脉注射100μl PBS;EMSC组每只小鼠通过尾静脉注射1×10~6个h EMSCs;BMSC组每只小鼠通过尾静脉注射1×10~6个h BMSCs进行细胞移植治疗。2.细胞移植治疗后后1day、2day、3day、7day记录小鼠的存活率。3.取眼球静脉血检测各组小鼠ALF后4h,及细胞移植治疗后1day、2day、3day血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、凝血酶原水平反映小鼠肝功能。4.实验终点留取肝脏组织,切片进行HE及DHE染色,提取蛋白进行Western Blot检测炎症相关蛋白TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β2表达水平以及抗凋亡蛋白Bcl2表达水平。通过观察各组小鼠的存活率,血清学变化,肝脏组织形态学变化,反映h EMSCs治疗ALF的效果。通过DHE染色检测不同组小鼠氧化应激水平;Western Blot检测不同组小鼠肝脏炎症相关蛋白TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β2的表达差异及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达差异,探索h EMSCs治疗ALF的可能机制。结果:1.按照4ml/kg的注射剂量一次性腹腔注射50%体积分数的CCl4,可以成功建立C57小鼠急性肝衰竭模型:与注射橄榄油的空白对照组(oil组)相比,各模型组小鼠存活率明显下降(p<0.05);注射50%的CCl44h后模型组小鼠血清ALT水平明显升高(p<0.0001);AST水平亦明显升高(p<0.0001)。2.ALF模型建立后,PBS治疗组小鼠存活率最低,ALF后1day之内大量死亡;而Oil组观察全程无死亡出现。进行细胞移植的EMSC组小鼠和BMSC组小鼠存活率比PBS组有所提高,直至观察终点,移植h EMSCs的小鼠比移植h BMSCs的小鼠存活率高。h EMSCs治疗组可显著提高ALF后小鼠的存活率(p<0.05)。3.在细胞移植后1day,EMSC组、BMSC组与PBS组相比,ALT水平显著降低(p<0.0001);EMSC组与PBS组相比,AST水平显著降低(p<0.05)。EMSC组与PBS组相比,ALP水平显著降低(p<0.001);BMSC组与PBS组相比,ALP水平显著降低(p<0.01)。在细胞移植后2day,EMSC组与PBS组相比,ALB水平显著提高(p<0.0001);EMSC组与BMSC组相比,ALB水平升高明显(p<0.01)。在细胞移植后2day,EMSC组、BMSC组、PBS组凝血酶原水平均比Oil组明显降低(p<0.05)。h EMSCs治疗和h BMSCs治疗可以改善ALF后小鼠的肝功能。4.肝脏组织切片,HE染色结果显示h EMSCs治疗和h BMSCs治疗可以恢复ALF后受损小鼠肝脏组织,减少肝脏坏死程度。EMSC组与PBS组相比,EMSC组损伤更轻(p<0.05);BMSC组与PBS组相比,BMSC组损伤更轻(p<0.05);EMSC组与BMSC组相比,无显著差异。5.DHE染色氧化应激水平检测中,EMSC组与PBS组相比,EMSC组表达水平更低(p<0.05),提示h EMSCs治疗可以显著降低损伤肝脏局部氧化应激水平。6.h EMSCs治疗和h BMSCs治疗可以调节炎症相关因子表达,PBS组与EMSC组相比,EMSC组TNF-α表达更低(p<0.01);PBS组与BMSC组相比,BMSC组TNF-α表达更低(p<0.05);PBS组与EMSC组相比,EMSC组IL-1β表达更低(p<0.001);PBS组与BMSC组相比,BMSC组IL-1β表达更低(p<0.05);EMSC组与BMSC组相比,EMSC组IL-1β表达更低(p<0.05)。PBS组与EMSC组相比,EMSC组抗炎因子IL-10、TGF-β2表达更高(p<0.05)。7.h EMSCs治疗可提高抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,PBS组与EMSC组相比,EMSC组Bcl-2表达更高(p<0.01)。结论:1.h EMSCs移植可以提高ALF小鼠存活率,减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝衰竭后的肝脏损伤。2.h EMSCs可能通过降低损伤肝脏氧化应激水平,降低肝脏局部炎症反应,减轻凋亡水平,从而减轻肝脏损伤。