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目的探讨脂磷壁酸(LTA)和/或脂多糖(LPS)对人牙周膜细胞(hPDLC)凋亡及分泌炎性细胞因子的影响。方法组织贴壁法体外培养hPDLC,以hPDLC为受试对象,LTA、LPS为施加因素。1.利用透射电镜观察LTA和/或LPS作用后hPDLC超微结构的变化及凋亡小体,用MTT法检测LTA和LPS对hPDLC的抑制作用,ELISA检测TNF-α的表达,流式细胞术对凋亡细胞进行定量分析;2.采用Re 1-time PCR技术检测hPDLC Fas、Bax、Cytochrome C、Caspase-3 mRNA的表达,Western-blot技术检测相应蛋白的表达;3.抗体芯片技术检测炎性细胞因子的改变。结果1.凋亡相关改变:透射电镜下,LTA和/或LPS作用hPDLC12h后,细胞质浓缩,空泡及凋亡小体出现;且同一时间点10μg/ml LTA与1μg/ml LPS刺激hPDLC分泌TNF-α的量无统计学差异;流式细胞结果表明,各实验组细胞早期/晚期凋亡率及死亡率明显增加。2. Real-time PCR技术检测LTA和/或LPS作用于hPDLC 12h后,Fas、Cytochrome C、Caspase-3 mRNA表达均明显上调,BAX表达下降,Western-blot技术检测相应蛋白表达与mRNA结果一致。3.炎性细胞因子的改变:LTA和/或LPS作用于hPDLC后,上清液中多种细胞因子高表达,其中与细胞凋亡密切相关的IL-1在各实验组中均呈高表达,LTA+LPS组与LPS组、LTA组比较,其凋亡相关细胞因子TNF-α、TNF-β, IL-1表达均明显增加。结论1.LTA和LPS作用于hPDLC后,其细胞凋亡率升高。2.TNF-α的分泌量与LTA及LPS作用呈明显时间正相关。3.LTA和LPS作用后,hPDLC Fas、Cytochrome C、Caspase-3、mRNA表达与相应蛋白表达均升高,Bax mRNA表达下降。4.LTA和LPS作用后,hPDLC分泌的炎性因子高表达种类相似,但LTA所引起的炎性因子总体强度较弱。5.LTA和LPS共同作用于牙周膜细胞后,分泌的炎性因子种类及量均明显增多,且大于二者分别作用之和,表明两者有协同效应。