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目的大鼠内皮抑素基因克隆并在大肠杆菌中表达。方法以大鼠脑组织总RNA为模板，采用RT—PCR法从中扩增内皮抑素基因，并将获得基因重组入pThiohis表达载体，重组子经双酶切、PCR及测序鉴定。利用已成功转化的pthiohis-Endo融合表达重组子的大肠杆菌TOP10，在IPTG诱导下表达融合蛋白，亲和层析方法纯化，纯化产物EK酶酶切后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot鉴定，MTT法鉴定其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。结果从大鼠脑组织中成功扩增内皮抑素的eDNA片断，并将其克隆入pThiohis载体，经双酶切、PCR及测序鉴定，产物大小及基因序列与预期值相符。经过亲和层析方法纯化的内皮抑素融合蛋白行EK酶酶切后经聚丙烯酰胺电泳和Western-blot鉴定与预期相符，并能抑制人脐静脉内皮细胞增殖。结论成功克隆大鼠内皮抑素基因并在大肠杆菌中表达，获得具有生物学活性的内皮抑素融合蛋白，为今后自主开发利用内皮抑素进一步奠定实验基础。