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腹主动脉瘤是对人类健康危害性极大,死亡率甚高的全球性常见病。随着社会老龄化的到来,腹主动脉瘤的发病率呈逐年上升趋势。腹主动脉瘤的发病机制涉及遗传、环境、血流动力、生物化学等多种因素,腹主动脉粥样硬化是腹主动脉瘤形成的重要危险因素之一,建立一种脂质代谢和斑块与人类相似的腹主动脉粥样硬化性动物模型是探索腹主动脉瘤发病机制及治疗具有重要意义。本文研究建立简便、成功率高的兔动脉粥样硬化性腹主动脉瘤模型,为进一步腹主动脉瘤治疗的研究奠定了实验基础。
目的:
建立一种脂质代谢和斑块与人类相似的腹主动脉粥样硬化动物模型,并与传统单纯高脂饮食动物模型对比。
材料方法:
1.实验动物
健康雄性日本大耳白兔20只,体重2300g-3300g,由中国医科大学动物实验中心提供。兔按昼夜时程在室温下单笼饲养,自由饮水。
2.高脂饲料的配制
高脂饮食基础饲料中加入胆固醇(安徽至诚生物科技公司)、蛋黄粉(市售)、猪油(市售),三种成分按1%,3%,5%配比,配置成本实验用高脂饮食饲料。
3.实验动物处理
健康雄性日本大耳白兔20只,随机将实验兔分为2组,对照组10只,实验组10只。所有单笼饲养,自由摄取饮水。对照组兔单纯高脂饲料喂养,对照组高脂饮食1周后,用弹性蛋白酶浸润的消毒棉包绕腹主动脉浸润20分钟,术后继续给予高脂饮食。所有兔共喂养16周,于实验开始时及16周末所有实验兔样本测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。16周末所有样本行腹主动脉取材行病理检查。通过图像分析软件测量血管内膜厚度和泡沫细胞面积率的变化,来判定弹性蛋白酶损伤法的效果。
4.统计学方法
采用SPSS17.0软件进行统计分析,所有计量资料以均数士标准差来表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异具有统计学显著性。
实验结果:
高脂饲料喂养16周末,两组兔血脂水平均明显升高。HE染色以及弹力纤维染色观察内膜厚度与泡沫细胞阳性面积率:弹性蛋白酶损伤组+高脂饲养组腹主动脉内膜厚度大于单纯的高脂饲养组,差异有统计学意义(P<0.05),弹性蛋白酶损伤组+高脂饲养组腹主动脉泡沫细胞阳性面积率高于单纯高脂饲养组,差异有统计学意(P<0.05)。
结论:
与单纯高脂饮食法相比,弹性蛋白酶损伤+高脂饮食法试验兔16周末可形成更明显的动脉粥样性血管病变,泡沫细胞的阳性面积率高,模型稳定性好。