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目的研究microRNA-21对人肝星状细胞株LX-2中MMP-2mRNA转录水平以及胞外MMP-2活性的调控作用及其可能的分子机制。方法1. PDGF-BB对LX-2细胞中microRNA-21、MMP-2的影响用5ng/ml PDGF-BB刺激LX-2细胞：1)24h后,real-time RT-PCR检测各组细胞中microRNA-21、MMP-2的表达；2)48h后,明胶酶谱法检测各组胞外MMP-2活性。2.外源microRNA-21对LX-2细胞中microRNA-21、MMP-2的影响分别转染50nM pre-microRNA-21或anti-microRNA-21至LX-2细胞：1)48h后,real-time RT-PCR检测各组细胞中microRNA-21、MMP-2的表达；2)72h后,明胶酶谱法检测各组胞外MMP-2活性；3)72h后,western blot检测各组细胞中PTEN蛋白。3.Akt抑制剂的作用分析Akt抑制剂LY29400250μM处理LX-2细胞,按照不同时间点收集样本：1) western blot检测各组细胞中Akt及P-Akt蛋白的表达；2) real-time RT-PCR检测各组细胞中MMP-2mRNA的表达；3)明胶酶谱法检测各组细胞外MMP-2活性。结果1.1) PDGF-BB处理组nicroRNA-21表达及MMP-2mRNA转录水平均较对照组表达显著升高。2) PDGF-BB处理组胞外MMP-2活性较对照组增强。21) pre-microRNA-21转染组microRNA-21表达及MMP-2mRNA水平均较negative control转染组显著上调,且与PDGF-BB刺激后效果类似；而转染anti-microRN A-21可减弱PDGF-BB对MMP-2mRNA水平的上调作用。2) pre-microRNA-21转染组胞外MMP-2活性较negative control转染组增强,与PDGF-BB刺激后效果类似；而转染anti-microRNA-21可减弱PDGF-BB增强胞外MMP-2活性的作用。3) pre-microRNA-21转染组的PTEN蛋白表达较negative control转染组降低,而anti-microRNA-21转染组的PTEN蛋白表达较negative control转染组增加；且PDGF-BB可协同pre-miR-21下调PTEN蛋白表达,而在转染anti-microRNA-21后,PDGF-BB下调PTEN蛋白表达的作用减弱。3.1) PDGF-BB处理组P-Akt表达增强,而LY294002+PDGF-BB处理组P-Akt水平较前者下降；pre-microRNA-21转染组P-Akt表达增强,而LY294002可明显削弱这一上调作用；各组间总Akt水平无显著差异；2) LY294002+PDGF-BB处理组MMP-2mRNA水平较单纯PDGF-BB处理组显著下调；LY294002+pre-microRNA-21处理组MMP-2mRNA水平较单纯pre-microRNA-21转染组显著下调；3) LY294002+PDGF-BB处理组胞外MMP-2活性较单纯PDGF-BB处理组减弱；LY294002+pre-microRNA-21处理组胞外MMP-2活性较单纯pre-microRNA-21转染组减弱。结论在LX-2细胞中,PDGF-BB上调1nicroRNA-21表达,后者在转录后水平抑制靶标PTEN的表达,继而激活PI3K-Akt信号通路介导MMP-2mRNA转录上调和胞外MMP-2活性增强。