【摘 要】
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非编码RNA在基因组中占有很大比例,对非编码RNA的功能研究逐渐引起了人们的关注,microRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为18-24个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在
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非编码RNA在基因组中占有很大比例,对非编码RNA的功能研究逐渐引起了人们的关注,microRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为18-24个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在生物体中参与转录后基因表达调控。miRNA17-5p、20a同属于miRNA17家族、miRNA17-92 cluster,miRNA17家族已被报道在肿瘤细胞中高表达,对其在肿瘤发生、衰老中的调控作用有很大的研究意义。本实验通过decoy技术抑制miRNA17家族在乳腺癌中表达,鉴定其对抑制肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用。miR-17家族一共包含8个miRNA,他们第二到第八个碱基具有高度同源性,称为种子序列。通过构建一个包含可以与miRNA17家族互补序列的慢病毒载体来感染乳腺癌细胞。通过这种decoy技术降低miRNA17家族在乳腺癌细胞中的表达,记录肿瘤细胞增殖情况,绘制细胞生长曲线,确定decoy17能否抑制肿瘤细胞增殖,并通划痕实验和transwell实验确定decoy17对肿瘤细胞增殖、迁移能力的影响。在小鼠体内进一步验证实验结果,并探索miRNA与下游靶蛋白的作用机制。通过这些探索,有望发现一种新的抑制肿瘤的方法
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