目的：　　探讨卡介苗（BCG）与结核分枝杆菌国际标准无毒株（H37Ra）构建的融合菌株（B/R菌株）的生长特性、定植性及遗传稳定性。　　方法：　　1.Sauton液体培养基分别培养BCG、H37Ra和B/R菌株，并在连续培养的第3、6、9、12、15、18、21、24、27、30天（d）取菌液并测定其在波长600nm处的OD值。然后以时间（Time）为横坐标，OD600值为纵坐标，绘制上述三种菌株的生长曲线。　　2.C57BL/6小鼠随机分3组，分别皮下接种BCG、H37Ra和B/R菌株的菌液0.1mL（含活菌数为1.0×106个），免疫后的第15、30、45、60及75天取各组小鼠脾脏、肺脏及肝脏，制成脏器组织匀浆，取匀浆液0.1mL接种于罗氏固体培养基斜面上，培养20天，分别计算三组菌株在不同脏器的菌落数(Log10cfu)。　　3.提取B/R菌株、BCG和H37Ra菌株的总RNA，进行纯度鉴定后并逆转录成cDNA，通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测上述三种菌株esat-6、ag85b、mpt70和mpt83基因的mRNA相对表达水平，比较三种不同菌株中esat-6、ag85b、mpt70和mpt83基因表达的差异。　　4.分别提取B/R菌株第1代到第20代的基因组DNA，以其为模版PCR分别扩增每代B/R菌株的esat-6、ag85b、mpt70和mpt83基因，比较分析B/R菌株的传代稳定性。　　结果：　　1.根据所绘生长曲线图，与亲本菌株BCG和H37Ra菌株相比，B/R菌株的生长适应期较长，6天后才开始进入生长对数期，27天后进入平台稳定期；　　2.在相同免疫时间下，B/R菌株在小鼠不同脏器内的Log10cfu均高于BCG和H37Ra菌株。其中，与BCG和H37Ra菌株组比较，B/R菌株在小鼠肝脏内的Log10cfu稍高，但差异无统计学意义(P>0.05)。且随着免疫时间的增加，三种菌株在小鼠肝脏内的Log10cfu有升有降，时间趋势不明显。在五个不同免疫时间点，B/R菌株在小鼠脾脏内的Log10cfu均明显高于BCG菌株，且差异有统计学意义(P<0.05)；在免疫后的15、45以及75天，B/R菌株在小鼠脾脏内的Log10cfu高于H37Ra菌株，且差异有统计学意义(P<0.05)。且随着免疫时间的增加，三种菌株在小鼠脾脏内的Log10cfu整体呈下降趋势，但在免疫后的75天，H37Ra和B/R菌株在小鼠脾脏内的Log10cfu较60天组有小幅度的上升，而BCG在小鼠脾脏内的Log10cfu仍呈下降趋势。在五个不同免疫时间点，B/R菌株在小鼠肺脏内的Log10cfu均明显高于BCG菌株，且差异有统计学意义(P<0.05)；在免疫后的15和45天，B/R菌株在小鼠肺脏内的Log10cfu高于H37Ra菌株，且差异有统计学意义(P<0.05)。且随着免疫时间的增加，三种菌株在小鼠肺脏内的Log10cfu明显呈下降趋势。　　3.qRT-PCR检测结果显示，与BCG菌株比较，mpt70和mpt83基因在B/R融合菌株中的mRNA表达量有不同程度的下调，但差异无统计学意义(P>0.05)；在H37Ra菌株中的mRNA表达量也有不同程度的下调，且差异有统计学意义(P<0.05)。与 H37Ra菌株比较，mpt70和mpt83基因在B/R融合菌株和BCG菌株中的mRNA表达量均有不同程度的上调，且差异有统计学意义(P<0.05)；esat-6和ag85b在B/R菌株中的mRNA表达量均有不同程度的上调，且差异有统计学意义(P<0.05)。　　4.PCR扩增结果显示，第1代到第20代的B/R菌株均能扩增出的esat-6、ag85b、mpt70和mpt83四个目的基因，且大小位置相同，条带清晰明亮。　　结论：　　1.B/R菌株的生长周期为30天，其在小鼠体内至少可存活75天，且定植能力较强。　　2.B/R菌株在20个代次以内的基因水平达到了生物制品传代稳定性的要求。