精原干细胞(Spermatogonial stem cells, SSCs)——雄性生殖干细胞(Germline stem cells, GSCs)——是一类特殊的体细胞干细胞,能够无休止的自我复制、分化形成精子,集有丝分裂、减数分裂和细胞形态发生为一体；在体外,SSCs还能被诱发去分化形成类胚胎干细胞(Embryonic stem cell-like cells, ES-like)的多功能干细胞。因此,研究SSCs不但具有其重要的生物学意义,在家畜的优良育种、基因改造,以及治疗男性不育、干细胞组织修复都具有潜在的应用前景。然而,阐述SSCs的自我复制、分化合去分化的机制,以及应用SSCs生物技术的前提条件是建立可靠的SSCs体外培养体系。为了实现上述这个长期的研究目标,我们通过用THY-1抗体分选法成功的分别从出生后5-8天不同品系雄性小鼠睾丸中分离出较高纯度的SSCs,并建立SSCs细胞系,在体外培养超过3个月。建立的SSCs细胞系分别为：表达CAT/GFP、OCT4/GFP标记基因,以及纯系C57小鼠和遗传背景为DBA×C57小鼠的SSCs细胞系。此外,我们尝试性的利用睾丸细胞外基质支架(Extracellular matrix, ECM)培养睾丸细胞,结合4种不同的培养体系,期望建立精子发生的体外分化体系。初步结果显示,睾丸支架具有一定支持SSCs分化的能力,然而深入细致的工作还有待我们进一步的努力。