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目的:验证ddPCR法能否用于检测血浆ctDNA中c-MET扩增,从而指导一代EGFR-TKI非小细胞肺癌获得性耐药患者的治疗,研究ddPCR法检测血浆ctDNA中c-MET扩增的阳性率,情况允许送检组织用FISH法检测c-MET扩增,比较两种方法检测c-MET扩增的一致性。 方法:收集2016年5月-2018年2月就诊于内蒙古医科大学附属医院经EGFR-TKI(一代)治疗后获得性耐药的晚期肺腺癌患者120人,每2月通过门诊或电话随访,根据获得性耐药标准的定义及实体肿瘤疗效评价标准(RECIST1.1)判断患者病情有进展,抽血后用ddPCR法检测血浆中c-MET扩增的阳性率,情况允许进行第二次组织活检,用FISH法检测c-MET扩增,比较两种方法检测c-MET扩增的一致性,同一份血浆同时检测EGFR T790M突变,以便与c-MET扩增进行对照。继续随访患者,部分患者送血液检测2次以上进行动态比较,直至患者疾病进展或结束随访。 结果:本研究根据Jackman对EGFR-TKI获得性耐药的定义,共纳入120例在接受一代EGFR-TKI治疗后出现获得性耐药的EGFR敏感突变的晚期非小细胞肺癌患者,共送检血浆标本132例,其中c-MET扩增的阳性率为0(0/132),用同一份血浆标本同时检测EGFR T790M突变率为44.7%(59/132),提示所选用的ddPCR法在血浆ctDNA中检测c-MET扩增可能不够敏感,本研究中c-MET扩增的阳性标准是≥2.2,用ddPCR法检测血浆ctDNA中c-MET扩增阳性率为0,用c-MET丰度结合EGFR T790M突变,定量资料用(X)±s表示,在EGFR T790M突变阳性组中c-MET丰度低,而EGFR T790M突变阴性组中c-MET丰度相对高,两独立样本进行t检验,P=0.002,差异有统计学意义,说明c-MET扩增可能多出现在EGFR T790M突变阴性组,提示c-MET扩增与EGFR T790M突变两种耐药机制可能不同时出现。 结论:1.本研究用ddPCR法检测一代EGFR-TKI耐药的晚期非小细胞肺癌患者ctDNA中c-MET扩增阳性率为0(0/132),同一份血浆标本同时检测EGFR T790M突变率为44.7%(59/132),说明ddPCR法检测血浆中EGFR T790M突变敏感度高,而检测血浆中c-MET扩增的敏感度低,故ddPCR法不适合用于检测血液ctDNA中c-MET扩增。2.EGFR T790M突变阳性组的c-MET丰度明显低于EGFR T790M突变阴性组,说明c-MET扩增可能更容易出现在EGFR T790M突变阴性的耐药患者中,提示c-MET扩增与EGFR T790M突变这两种耐药机制可能不同时存在。