不同硬膜外覆盖物预防腰椎手术后瘢痕粘连形成的实验研究

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[研究目的]评价使用不同硬膜外覆盖物对腰椎术后硬膜囊周围瘢痕粘连形成的程度和影响因素,并初步探讨其机制。[研究方法]将Wistar大鼠80只采用随机数字表法随机分为四组,实验1组(使用胶原海绵加地塞米松);实验2组(单纯使用胶原海绵);实验3组(使用明胶海绵):对照组(无任何硬脊膜外覆盖物),每组实验动物20只,麻醉后在背部正中做切口行L1-L5全椎板切除,造成0.2cm×1.5cm骨性缺损,显露硬脊膜囊。实验1组动物硬膜外放置胶原海绵并注射0.1ML地塞米松,实验2组动物硬膜外放置胶原海绵,实验3组动物硬膜外放置明胶海绵,然后用显微器械缝合肌肉层和筋膜层,对和伤口,对照组则直接缝合肌肉筋膜组织关闭伤口。统一常规喂养12周后从原始切口重新切开,观察硬膜外瘢痕形成状况及其与硬脊膜粘连情况,并使用改良Rydell-balazs标准和改良Nuss-baum标准进行量化评定。将实验动物分组处死后,使用显微外科手段采取手术区域的组织标本,应用免疫组化检测和Western blot检测显示硬膜外瘢痕及周围组织中TGF-β1、VEGF表达情况,比较各实验组间差异。[结果]所有试验动物在研究过程中无意外死亡发生,硬膜外瘢痕组织应用Rydell-balazs评分结果显示:实验1组和实验2组与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01),与实验3组相比差异有显著统计学意义(P<0.01),而实验1组与实验2组间差异无统计学意义(P>0.05),实验3组与对照组之间差异无显著意义(P>0.05);应用改良Nuss-baum标准评分,结果显示实验1组和实验2组与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01),与实验3组相比差异有显著统计学意义(P<0.01),而实验1组与实验2组间差异无统计学意义(P>0.05),实验3组与对照组之间差异无显著意义(P>0.05)。免疫组化结果显示TGF-β1和VEGF在四组标本中均有阳性表达,但在实验1组和2组中表达显著低于较实验3组和对照组,应用光密度分析显示:实验1组和实验2组与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01)、与实验3组相比差异有显著统计学意义(P<0.01);而实验1组与实验2组间差异无统计学意义(P>0.05)。实验3组与对照组之间差异无显著意义(P>0.05);Western blot检测显示TGF-β1和VEGF蛋白在四组标本中均有阳性表达,但在实验1组和实验2组中的表达明显低于较实验3组和对照组,应用光密度分析显示:实验1组和实验2组与对照组相比有显著差异(P<0.01)、与实验3组相比有显著差异(P<O.01);而实验1组与实验2组间相比无显著差异(P>0.05)。实验3组与对照组之间相比差异无显著差异(P>O.05)。[研究结论]胶原海绵可以显著降低实验大鼠腰椎术后硬膜周围瘢痕增生粘连的形成,同时加用局部注射地塞米松并没有加强这种作用;明胶海绵的局部应用并不能达到预防硬膜外瘢痕粘连的目的。胶原海绵应用后局部的TGF-β1和VEGF的低表达可能是减少硬膜外瘢痕增生粘连的重要机制之一。
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