玉竹糖蛋白的分离纯化及抗氧化作用研究

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玉竹[polygonatumodoratum(Mill.)Druee]是百合科黄精属植物玉竹类的干燥根茎,具有降血脂、降血压、缓解动脉粥样硬化斑形成的作用。为了玉竹资源的进一步开发,本课题选取玉竹为材料,对玉竹糖蛋白进行了分离、纯化及结构测定,并对玉竹糖蛋白的体外抗氧化活性进行了研究,试验主要结论如下:1.热水浸提玉竹糖蛋白最佳工艺,即料液比1:30、温度70℃,浸提时间4h、提取次数3次。在此最佳工艺条件下,试验验证玉竹糖蛋白得率为8.28%。2.微波辅助提取玉竹糖蛋白最佳工艺,即料液比1:40、提取次数2次,微波功率420W、提取时间3min,在此条件下,试验验证玉竹糖蛋白得率为8.85%。3.玉竹糖蛋白粗品PDGP经DEAE-52纤维素柱层析分离出PDGP-1和PDGP-2两种组分,经Sephadex G-100凝胶柱进一步分离纯化得到PDGP-1′、PDGP-2′,结果表明PDGP-1′、PDGP-2’均为均一玉竹糖蛋白组分,PDGP-1′、PDGP-2′分子量分别为92.45kD和60.28kD。4.经过分离纯化得到的两种玉竹糖蛋白,用苯酚-硫酸法和Folin-酚法对其进行测定。两种玉竹糖蛋白PDGP-1′、PDGP-2′的糖含量分别为:75.22%、75.13%;蛋白质含量分别为:16.35%,18.42%。糖蛋白中糖的含量含多于蛋白含量。5.玉竹糖蛋白的单糖组成分析和红外光谱分析表明:PDGP-1′中的糖链主要成分是葡萄糖、半乳糖,含少量的鼠李糖;PDGP-2′中的糖链主要成分是葡萄糖、半乳糖,含少量的果糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖。两种糖蛋白分子内都含有吡喃糖环。6.PDGP-1′和PDGP-2′经过氨基酸自动分析仪测定,结果显示两种玉竹糖蛋白均含有18种氨基酸,且具有相同的氨基酸种类,因此玉竹糖蛋白营养价值较高。7.体外抗氧化试验结果显示,玉竹糖蛋白具有显著的还原能力。玉竹糖蛋白对有机自由基(DPPH)和羟基自由基有明显的清除作用,并且随着PDGP质量浓度的增加,清除能力增强。
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