宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，占全世界妇女癌症死亡率第二位，仅次于乳腺癌。在某些发展中国家宫颈癌死亡率甚至居首位。宫颈癌的传统治疗方法有手术、放疗、化疗等，但这些手段各有其局限性。研究表明，HPV是宫颈癌的主要致病因子，几乎所有的宫颈癌发病都与高危型HPV感染有关。本课题以宫颈癌治疗性疫苗为中心，开展了两个方向的研究，即基于HPV16E6E7基因疫苗的抗肿瘤免疫反应研究以及优化突变融合基因HPV18E6E7的去致癌性检测。E6和E7蛋白是高危型HPV的主要致癌蛋白，E6蛋白通过结合并降解P53蛋白，破坏正常的细胞周期调控，促使细胞永生化；E7蛋白则通过结合并降解pRb蛋白而使其丧失抑癌功能。E6和E7蛋白在正常组织中不表达，只表达于HPV感染组织中，因此E6和E7蛋白是制备宫颈癌治疗性疫苗的理想靶抗原。在疫苗的抗肿瘤免疫反应研究中，以优化突变融合的HPV16E6E7基因为抗原基因，构建重组腺病毒疫苗和重组DNA疫苗，另外用表达野生型和突变型E6E7蛋白的重组腺病毒感染小鼠树突状细胞，得到致敏树突状细胞疫苗。用ELISPOT检测疫苗免疫小鼠后诱导的细胞免疫反应；通过肿瘤移植保护实验检测疫苗的抗肿瘤效果。结果表明致敏树突细胞引发了强烈的细胞免疫反应，同时具有较好的抗肿瘤免疫效果。在优化突变融合基因HPV18E6E7的去致癌性检测中，本课题参照人类基因中的优势密码子，对HPV18E6基因和E7基因进行优化合成，同时对E6基因和E7基因进行定点突变和融合，以消除其致癌性。实验表明两种优化突变融合的HPV18E6E7基因失去了对NIH3T3细胞的转化活性和对BALB/c裸鼠的致瘤作用，表明优化融合突变基因是安全的。