PopW是实验室从青枯劳尔氏菌（Ralstoniasolanacearum）ZJ3721中克隆得到的一种harpin蛋白。前期研究表明,PopW不仅具有广谱抗病性,可以诱导植物防御多种病害之外,还具有诱导抗旱功能,但PopW调控植物抗逆的作用机理仍不清楚。本文通过构建番茄cDNA文库,利用酵母双杂交法初步尝试筛选文库,期望找到PopW的互作蛋白。3次筛选后,共有70个酵母单菌落可以在含有X-α-gal的酵母营养缺陷培养基上正常生长且变蓝。在NCBI上比对发现它们可以分成两类,除了一个属于WD40蛋白家族,与PopW互作较强外,其余均属于SAP家族,与逆境相关,与PopW互作较弱。我们后续选择WD40蛋白进行酵母一对一的验证,结果发现WD40与PopW存在互作关系。文献报道表明,拟南芥中有很多因子参与调控免疫反应,如BAK1和LLG1。还有很多转录因子也参与其中,如MYB类中的2、15、41、44、60、96和102,WRKY类中的15、25、40、46、53、54、60、63和70。为了研究它们是否响应PopW的诱导,将BAK1和LLG1分别构建到pGADT7载体中,转入含诱饵载体的酵母菌株AH109。结果显示,BAK1与PopW是互作的,LLG1与PopW不存在互作关系。检测转录因子时,用PopW喷雾处理拟南芥,利用RT-PCR和qPCR检测转录因子的表达水平。RT-PCR显示,MYB类转录因子的表达水平均有不同程度的提高,其中MYB2、MYB15的表达增强较明显;WRKY类转录因子的表达水平也有不同程度的提高,其中表达水平增强比较明显的是WRKY40、WRKY46、WRKY54、WRKY60和WRKY63。选择MYB2、WRKY40和WRKY54用qPCR定量检测表达水平,结果与RT-PCR所得一致,表明MYB2、WRKY40和WRKY54响应PopW调控植物免疫过程。同时在酵母中一对一验证它们与PopW是否互作,结果发现它们的自激活能力太强,无法使用酵母双杂交法验证。除此之外,本研究还构建了 3个验证蛋白互作需要使用的标签载体,为后续验证蛋白-蛋白互作提供了材料。