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第一部分右侧颈交感神经干离断联合不同镇痛药物对大鼠心肌梗死后心室重构的影响目的探索右侧颈交感神经干离断联合不同镇痛药物(帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡)对大鼠心肌梗死后心室重构的影响。方法采用结扎心脏冠状动脉前降支的方式构建MI模型及离断右侧颈交感神经干的方法建立TCST模型,36只雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):Sham组、MI组、TCST组、TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组。MI及右TCST建模后,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组大鼠分别腹腔注射12 mg/kg帕瑞昔布、15 mg/kg氟比洛芬酯、1.2 mg/kg吗啡,2次/d,共3d。于建模处置4周超声心动图检测各组大鼠的心脏功能变化;右侧颈动脉插管的方法测定大鼠血流动力学结果;处死大鼠,取心脏测定左室肥厚指数;HE染色、Masson染色观测梗死周边区心肌组织病理变化和间质胶原蛋白增生情况;Sq RT-PCR法检测梗死周边区心肌ANP m RNA、BNP m RNA含量的变化;q RT-PCR法检测梗死区心肌炎症因子IL-6 m RNA、TNF-αm RNA的表达。结果1心功能结果:与Sham组比较,MI组大鼠心功能指标LVEDd、LVESd显著增加,LVEF、LVFS显著减少(P<0.05);与MI组比较,各治疗组LVEDd、LVESd降低,LVEF、LVFS升高(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组LVEDd、LVESd降低,LVEF、LVFS升高,其中TCST+M组心功能改善最显著(P<0.05)。2血流动力学结果:与Sham组比较,MI组大鼠心功能指标LVSP、+dp/dtmax显著降低,LVEDP、-dp/dtmax显著升高(P<0.05);与MI组比较,各治疗组LVSP、+dp/dtmax升高,LVEDP、-dp/dtmax降低(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组LVSP、+dp/dtmax升高,LVEDP、-dp/dtmax降低,其中TCST+M组血流动力学改善效果最明显(P<0.05)。3左室肥厚指数改变:与Sham组比较,MI组体重降低,左室肥厚指数各指标HW/BW、(LV+S)/BW、(LV+S)/HW升高(P<0.05);与MI组比较,单用TCST治疗组体重升高,左室肥厚指数各指标降低(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组体重升高,左室肥厚指数各指标降低,其中TCST+M组左室肥厚指数降低最明显(P<0.05)。4心肌组织形态学改变:Sham组心肌细胞排列有序,无断裂,显示正常心肌细胞形态;MI组梗死周边区心肌细胞肿胀增粗最显著,排列紊乱,细胞间隙出现大量胶原蛋白增生,呈网状分布,炎性细胞浸润明显,胶原容积分数CVF增多(P<0.05);单用TCST治疗组心肌细胞排列紊乱及间质纤维化水平有明显减轻,CVF较MI组降低(P<0.05);TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组梗死周边区心肌细胞排列较有序,间质纤维降低,炎性细胞浸润进一步减轻,CVF较TCST组降低,其中TCST+M组病理改善效果最明显(P<0.05)。5梗死周边区ANP m RNA、BNP m RNA改变:与Sham组比较,MI组梗死周边区心肌肥厚标志物基因ANP m RNA、BNP m RNA的表达升高(P<0.05);与MI组比较,TCST干预可降低ANP m RNA、BNP m RNA的表达(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组ANP m RNA、BNP m RNA的表达降低,其中TCST+M组降低最显著(P<0.05)。6梗死区IL-6 m RNA、TNF-αm RNA的表达变化:与Sham组比较,MI组梗死区炎症因子IL-6 m RNA、TNF-αm RNA的表达升高(P<0.05);与MI组比较,TCST干预可降低IL-6 m RNA、TNF-αm RNA的表达(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组IL-6 m RNA、TNF-αm RNA的表达降低,其中TCST+M组降低最显著(P<0.05)。结论1单用TCST及TCST与帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡联合治疗均可提高大鼠心肌梗死后心肌舒缩功能,一定程度上减轻心肌肥厚、间质纤维化,延缓心室重构过程。2 TCST与帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡联合治疗延缓大鼠心梗后心室重构的效果优于单用TCST治疗,且以TCST联合吗啡改善心室重构的效果最优。3 TCST同帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡联合治疗延缓MI后心室重构的机制可能与其强烈的镇痛作用降低了交感神经系统的活性;降低炎症因子IL-6、TNF-α的表达,减少炎症反应有关。第二部分右侧颈交感神经干离断联合不同镇痛药物对大鼠心肌梗死后PI3K/Akt信号通路的影响目的探讨右侧颈交感神经干离断联合不同镇痛药物(帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡)对大鼠心肌梗死后PI3K/Akt信号通路的影响。方法采用结扎心脏冠状动脉前降支的方式构建MI模型及离断右侧颈交感神经干的方法建立TCST模型,36只雄性SD大鼠随机分为6组(n=6):Sham组、MI组、TCST组、TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组。MI及右TCST建模后,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组大鼠分别腹腔注射12 mg/kg帕瑞昔布、15 mg/kg氟比洛芬酯、1.2 mg/kg吗啡,2次/d,共3d。于建模4周时处死大鼠,取心脏进行Tunel染色,光镜下观测心肌细胞凋亡情况;Western Blot法测定心肌PI3K、Akt、p-Akt、pro-caspase3、caspase3的蛋白表达。结果1心肌细胞凋亡的测定结果:与Sham组比较,MI组在梗死周边区及远隔梗死区组织都存在许多的心肌细胞发生凋亡,周边区凋亡指数AI明显增加(P<0.05);与MI组比较,经TCST处理后梗死周边区及远隔梗死区组织心肌细胞凋亡发生明显减少,周边区AI下降(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组梗死周边区及远隔梗死区组织凋亡的心肌细胞进一步降低(P<0.05),其中TCST+M组梗死周边区组织AI下降最显著(P<0.05)。2 PI3K/Akt信号通路蛋白表达的改变:各组Akt、pro-caspase3蛋白表达无显著差异(P>0.05)。与Sham组比较,MI组梗死区组织PI3K、p-Akt蛋白表达均显著下降,caspase3蛋白表达显著上升(P<0.05);与MI组比较,TCST干预可提高PI3K、p-Akt蛋白表达,降低caspase3蛋白表达(P<0.05);与TCST组比较,TCST+P组、TCST+F组、TCST+M组PI3K、p-Akt蛋白表达均增加,caspase3蛋白表达降低(P<0.05)。结论TCST同帕瑞昔布、氟比洛芬酯、吗啡联合治疗延缓MI后心室重构的机制可能通过增强PI3K/Akt抗凋亡信号通路的表达,下调细胞凋亡蛋白caspase3,抑制心肌细胞凋亡有关。