miR-196b-5p在MDS患者治疗前后的表达变化及其意义

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目的 通过检测骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者治疗前后骨髓细胞中miR-196b-5p的表达水平,分析初治MDS患者骨髓miR-196b-5p表达水平与临床病理参数的相关性,分析MDS患者治疗前后miR-196b-5p表达变化情况,以及其变化与无进展生存期(Progress Free Survival,PFS)的关系,以探讨 miR-196b-5p 在 MDS 疾病发生及进展过程中可能的作用。方法 收集MDS患者诊断时及治疗后的骨髓液,每一位患者根据预后分层、年龄和体能状态等均接受了相应的治疗,包括免疫治疗、去甲基化治疗、化疗和异基因造血干细胞移植,同时收集同期性别、年龄相匹配的健康人骨髓液作为对照。首先利用实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)在21例初诊MDS患者(按照IPSS预后评分,包括1 1例低危和中危1在内的相对低危组患者、10例中危2和高危在内的相对高危组患者)、8例由MDS转化为急性髓细胞白血病的患者及14例健康对照组骨髓中检测 miR-196b-5p 及 ANXA1 和 DICER1 的表达量,分析 miR-196b-5p 在MDS各亚组之间的表达情况,并分析其表达量与MDS临床病理参数的相关性。在MDS患者接受相应治疗后,再次检测MDS患者治疗后骨髓中miR-196b-5p及ANXA1和DICER1的表达量,分析MDS治疗前后miR-196b-5p的表达变化及与疗效的相关性,探讨miR-196b-5p在MDS患者治疗前后的表达变化与预后的关系。结果(1)利用实时荧光定量PCR技术检测miR-196b-5p和ANXA1、DICER1在初治MDS患者骨髓细胞中的表达水平,结果显示:与健康对照组相比,miR-196b-5p在MDS患者中的表达量显著升高(P=1×10-4);分析miR-196b-5p在MDS不同危险分层中的表达情况,miR-196b-5p在相对低危组(低危组+中危I组)中表达升高,大约为健康对照组的2.2倍(P=0.035);且miR-196b-5p的表达量在相对高危组(中危II组+高危组)与健康对照组之间的差异更为显著,大约为对照组的3.3倍(P=1><10-3);在转白组中,miR-196b-5p的表达量增加了 7.2倍(P=6×10-6),提示miR-196b-5p的表达量随着MDS危险度的增加而升高,而ANXA1及DICER1的表达量与健康对照组并无差异。(2)分析MDS患者骨髓miR-196b-5p的表达量与临床病理参数(包括外周血血象、乳酸脱氢酶、骨髓原始细胞数、骨髓染色体核型)的相关性,结果显示:miR-196b-5p的表达量与MDS患者骨髓原始细胞数呈显著正相关(r=0.541,P=0.002),而与染色体核型无明显相关性(核型正常组:0.66±0.65,核型异常组:0.73±0.59,P=0.278),miR-196b-5p的表达量与外周血血象也无明显相关(白细胞计数:r=0.282,P=0.137;中性粒细胞绝对值:r=0.200,P=0.299;血红蛋白:r=0.103,P=0.593;血小板:r=-0.139,P=0.472),而 miR-196b-5p 的表达量与乳酸脱氢酶(LDH)呈显著正相关(r=0.525,P=0.003)。(3)利用实时荧光定量PCR技术检测MDS患者治疗后骨髓细胞中miR-196b-5p的表达水平,并与治疗前的miR-196b-5p 比较,结果显示,MDS患者治疗前后miR-196b-5p的表达量变化,总体来说是下调的,尤其是在去甲基化治疗组和化疗组,MDS患者经治疗后,miR-196b-5p的表达量显著下降(P<0.05)。(4)分析miR-196b-5p的表达与MDS患者PFS关系,结果显示:MDS患者治疗前miR-196b-5p的表达量与PFS无显著相关,同时分析MDS患者治疗前后miR-196b-5p表达量的变化情况与PFS的关系,发现MDS治疗后miR-196b-5p下降程度大的患者,其总体PFS、1年PFS和2年PFS均优于治疗后miR-196b-5p下降程度小的MDS患者。结论(1)miR-196b-5p在MDS患者骨髓细胞中显著高表达,在不同危险分层中其表达均升高,且随着危险度的增加miR-196b-5p表达水平也随之上升,miR-196b-5p的表达量与MDS患者骨髓原始细胞比例和外周血乳酸脱氢酶呈显著正相关,提示miR-196b-5p可能参与了 MDS的发生与疾病进展。(2)MDS患者治疗后miR-196b-5p的表达量明显下降,且治疗后miR-196b-5p表达量下降大的患者其PFS优于下降小的患者,是MDS无进展生存期的独立预后因素,提示miR-196b-5p可能参与MDS的进展且与MDS预后相关。
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