多环芳烃萘降解菌的分离鉴定以及降解途径的初步探究

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萘和菲是多环芳烃(PAHs)的典型代表,常被用作研究PAHs污染生物修复的模式化合物。对萘和菲生物降解的研究,可以帮助人们了解其他多环芳烃的降解机理和生物降解可行性,为最终消除PAHs和石油烃等难降解有机化合物的环境污染提供理论依据和治理方法。本实验利用单一碳源培养基,从武汉金口张公堤处污泥中富集分离得到两株能以萘为唯一碳源生长的优势降解菌株。通过形态学观察、生理生化特征测试及16S rDNA序列的系统发育分析,对分离菌株进行了鉴定,并采用PCR技术对菌株萘降解过程中的关键酶基因进行了克隆分析。菌株XA1和XB1均属于荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。菌株XA1和XB1在以萘为唯一碳源的无机盐液体培养基中的最适生长温度均为28℃,最适生长pH值分别为7.5和7.0。菌株XA1和XB1在以菲为唯一碳源的无机盐液体培养基中最适生长温度也均为28℃,最适生长pH值分别为7.0和7.5。在最适生长条件下,以3%的接种量分别将菌株XA1、XB1接种至含有500 mg/L萘的无机盐培养基中,3 d后它们对萘的降解率分别达到93.4%和74.7%;以10%的接种量分别将XA1、XB1及它们的混菌接种至含有500 mg/L菲的无机盐液体培养基中,7d后它们对菲的降解率分别达到75.1%、64.8%和82.1%。菌株XA1和XB1均含有儿茶酚2,3-X双加氧酶基因等萘降解过程中的关键降解酶基因,对其他PAHs如芴、荧蒽和苯并芘具有一定的降解能力,降解谱广。菌株XA1和XB1有较强的萘、菲降解能力,环境适应能力强,降解速度快,其在处理被多环芳烃污染的水体或土壤方面具有重要的应用前景。
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