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盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CL），俗名“瘦肉精”，是一种人工合成的β2-肾上腺素能兴奋剂，具有调节动物神经兴奋及其体内营养素重分配的功能。在肉畜饲料中添加盐酸克伦特罗，可以减缓或减少脂肪沉积，增加肌肉蛋白沉积，使营养重新分配，从而改善肉畜胴体品质。但由于盐酸克伦特罗难以代谢排出，会大量蓄积在动物机体内，维持较高的残留量，给人和动物带来严重的危害。虽然国家的政策法规已经严令禁止使用盐酸克伦特罗作为饲料添加剂，但仍有违规应用。因此，为保证肉品质量和人类的健康，建立准确、快速、简便的检测盐酸克伦特罗残留的方法具有重要的意义。目前，我国使用的盐酸克伦特罗ELISA检测试剂盒主要依赖于进口，价格昂贵，不利于推广使用，因此，开发具有自主产权的ELISA检测试剂盒已成为当务之急。要研制盐酸克伦特罗ELISA检测试剂盒，首先要制备出特异性强、敏感性高的抗盐酸克伦特罗的单克隆抗体。因此，本研究旨在研制抗盐酸克伦特罗的单克隆抗体并进行免疫学特性鉴定。本研究以重氮化法将盐酸克伦特罗偶联于载体牛血清白蛋白（BSA），形成的结合抗原BSA-CL作为免疫原，与等体积的弗氏完全佐剂充分混匀后腹部及皮下多点免疫6～8周龄BALB／C小鼠，每只小鼠96μg／只。然后每隔14天后再与弗氏不完全佐剂混合免疫小鼠，共免疫2次，末次加强免疫以96μg／只尾腹腔注射。同时将CL与卵清白蛋白（OVA）偶联制备检测原（OVA-CL）。四次免疫后选择免疫效价高的小鼠脾细胞与SP2／0骨髓廇细胞进行细胞融合。结果发现，365孔有融合细胞生长，融合率约为54％。以间接ELISA法筛选出291孔能分泌抗盐酸克伦特罗的单克隆抗体，阳性率约为80％。从中选出6株抗体采用有限稀释法进行3次克隆，经检测和筛选最终获得了18株稳定分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株，体内诱生腹水并进行纯化。挑选其中E9一C11、C11-E3、E7-G8三株高亲和力的细胞株进行免疫学特性鉴定。研究表明，三株抗体的亚类均为IgG1。细胞上清的间接ELISA效价分别为1：1280、1：1000、1：800，三株腹水效价都约为1×10-6。用竞争性ELISA法测定抗体的亲和常数及交叉反应性。亲和常数分别为2.4×10-8mol／L、2.83×10-8 mol／L、3.28×10-8mol／L。E9-C11单抗对CL的IC50为6.1035μg／L；对沙丁胺醇的IC50大于781.25μg／L，交叉反应性小于0.78％；对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、莱克多巴胺及部分维生素和抗生素均无交叉反应性。蛋白免疫印迹分析表明，获得了三株高特异性抗盐酸克伦特罗的单抗。为进一步研究其作为免疫检测试剂奠定了坚实的基础。