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组蛋白乙酰化修饰是支气管哮喘重要的发病机制，由组蛋白乙酰转移酶（histone acetyltransferase，HAT）及组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDAC)介导，P300是典型的组蛋白乙酰转移酶。支气管哮喘的病理特征之一是气道黏液高分泌，黏蛋白5AC（mucin5AC，MUC5AC）是气道最主要的黏蛋白。目前，许多研究表明MUC5AC基因的表达与组蛋白乙酰化作用相关，所以提出科学假设：组蛋白乙酰转移酶P300与MUC5AC基因的表达调控相关。 目的：克隆MUC5AC基因的启动子，并寻找该启动子的核心区域；探讨组蛋白乙酰转移酶P300对MUC5AC基因表达的影响。 方法：1.采用PCR法构建人MUC5AC基因5’端非翻译区大小为1348bp的片段并进行测序鉴定。2.以上述成功构建的产物为模板对启动子进行5’端截短分析，分别扩增983bp（-935/＋48），631bp（-583/＋48），253bp（-205/＋48），164bp（-116/＋48），71bp（-23/＋48）的片段，与pGL3-Basic载体重新连接，并通过双荧光素酶报告基因技术检测各片段启动子的活性。3.将P300突变质粒（P300mut）、P300过表达质粒（P300wt）以及P300siRNA、si-control和MUC5AC活性最大片段共转染入A549细胞，通过双荧光素报告基因检测技术测定MUC5AC启动子的活性；实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测MUC5AC的mRNA表达水平；细胞免疫荧光法检测MUC5AC的蛋白表达水平。 结果：1.通过DNA序列比对，验证成功构建不同长度的人MUC5AC基因5’侧翼区序列报告基因质粒。2.双荧光素酶活性分析显示：从-935bp缺失到-583bp位后，启动子活性显著下降，提示MUC5AC基因的核心启动子区域位于-935/＋48bp区域。3.与P300mut质粒相比，P300wt质粒可以明显下调MUC5AC基因启动子活性、抑制MUC5AC基因mRNA及蛋白的表达；与si-control相比，P300siRNA使MUC5AC基因启动子活性增强，上调了MUC5AC基因mRNA及蛋白的表达。（P＜0.05或P＜0.01）。 结论：成功构建不同长度的人MUC5AC基因5’侧翼区序列报告基因质粒；人MUC5AC基因的核心启动子区域位于-935bp至+48bp处；且P300可以下调MUC5AC基因的启动子活性，抑制MUC5AC基因的mRNA及蛋白的表达。