目的：(1)建立大鼠大肠癌动物模型；(2)分析激光诱导大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、早期及进展期大肠癌组织自体荧光光谱特征差异，探讨其区分方法；(3)探讨大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、早期大肠癌和进展期癌组织中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达差异和相关性。 方法：6～7周龄Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，采用二甲肼(DMH)腹腔注射，25 mg/kg，每周1次，共18周。分别于第4周、8周、12周、16周各解剖3只大鼠结肠和直肠，用370nm激发波长的调Q式钛宝石激光器激发大肠正常组织、可疑病变组织和肿块组织产生自体荧光，收集在体和离体组织的自体荧光光谱。留取部分组织置入液氮中保存，剩余组织行病理切片检查。余下大鼠在第20周后行相同处理。根据病理诊断分为正常组、不典型增生组、早期癌组和进展期癌组，比较分析各组组织自体荧光光谱特征和差异。用免疫组化染色的方法检测正常组、不典型增生组、早期癌组和进展期癌组各25例组织标本中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达，比较各组间差异，并进行相关性分析。用β-actin基因作为参照，半定量的RT-PCR法检测各组中组织蛋白酶B mRNA的表达，比较各组间的表达差异。中甫大学博士学位论文 结果:20周后成功诱导了大肠癌动物模型，大肠癌总诱导率为82%(49/60)，多发性大肠肿块大鼠占92%(45/49)。对283标本进行了在体和离体组织自体荧光检测，正常组64例，不典型增生组57例，早期癌组78例，进展期癌组84例。各组组织自体荧光光谱在460nm左右、505nm左右处大多有荧光峰;73%的进展期癌组织、69%的早期癌组织和54%的不典型增生组织的荧光光谱在 635nm附近有荧光峰。正常组在460nm左右波峰对应的波长与不典型增生组、早期癌组和进展期组对应波长比较发生紫移，波长紫移均值分别为4.3nm、10.Znm和10.gnm。离体组织在46Onm左右处波峰位置比较在体组织该处波峰位置有差异(p<0.05);早期癌组和进展期癌组自体荧光在460nm处的荧光强度比在正常组和不典型增生组要弱。早期癌组和进展期癌组工635/I;6。值、工635/160。值分别较正常组、不典型增生组的1635/I;6。值、1635/16。。值大(p(0.05)，早期癌组和进展期癌组的1635/I;6。值、1635/16。。值比较差异不显著性(p)0.05)，不典型增生组的1635/146。、1635/160。值分别较正常组1635/I;6。、1635/16。。值大(p(0.05)。正常组(或不典型增生组)的特定工635/工。6。值、1635/工60。值作为闭值区分正常组织和不典型增生组织、大肠癌组织(或正常组织、不典型增生组织与大肠癌组织)的总正确率约为80%。免疫组化染色显示正常组、不典型增生组、早期癌组、进展期癌组中的基底膜均有W胶原表达，正常大肠组织与不典型增生组织之间比较表达差异无显著性(p>0 .05);早期癌、进展期癌组织中表达减少，与正常大肠组织、不典型增生组比较，差异有显著性(p<0.05)。组织蛋白酶B在早期癌、进展期癌组否中南大学博d二学亡立论文织中表达较正常大肠组织和不典型增生组织表达增加，差异有显著性(p<0.05)。大肠癌组织中组织蛋白酶B表达与W胶原表达成负相关(相关系数二一0.721，p<0 .05)。组织蛋白酶B mRNA表达在癌组织中表达水平较正常组织、不典型增生组织中表达水平增加，早期癌组中组织蛋白酶B mRNA表达水平高于进展期癌组。 结论:(1)利用二甲腆腹腔注射法成功建立了大肠癌动物模型。 (2)激光诱导的大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、大肠癌组织 (包括早期和进展期大肠癌)的自体荧光光谱之间及在体组织和离体组织自体荧光光谱之间部分特征存在差异。(3)根据大鼠大肠组织特定荧光强度比值(1635瓜6。、1635/Ie0。)建立的区分标准有一定判别价值。(4)大鼠大肠癌组织中W胶原表达较正常组织和不典型增生组织中表达减少。(5)大鼠大肠癌组织中组织蛋白酶B表达较正常组织和不典型增生组织中表达增加。(6)大鼠大肠癌组织中组织蛋白酶B表达与W胶原表达成负相关，大肠癌组织中IV胶原减少可能与组织蛋白酶B增加有关。(7)早期大鼠大肠癌组织出现组织蛋白酶B基因表达上调可能是导致癌细胞分泌组织蛋白酶B并向基底膜侵犯降解IV胶原的重要原因。