PCR技术是一种简便、快速、特异、灵敏的检测方法,已被广泛应用于支原体病的早期诊断和支原体污染的初步筛选。检测支原体的靶序列一般选择在支原体种属高度保守区域(rRNA基因),或者是功能基因区域。支原体功能基因的编码序列特异性高,可各株之间存在有明显异质性,PCR时往往会出现敏感性过低现象。16SrRNA基因的敏感性极高,为PCR扩增的理想靶序列,但由于存在易与其他支原体交叉反应,重现性较差等情况,其应用也受到一定的限制。因此,建立PCR技术应用于支原体检测中,靶基因的合适选择是决定试验特异性和敏感性的关键。本试验以鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)为材料,通过实验室培养,收集菌体后,提取、纯化制备了基因组DNA。然后根据GenBank中登录的MG基因序列,选择16SrRNA基因高度保守区、黏附蛋白PvpA基因和抗原蛋白TM-1基因为靶基因,分别设计引物,建立常规PCR检测方法,对其特异性、敏感性进行比较。试验结果表明：以16SrRNA基因为靶序列建立的PCR检测法,其敏感性最高,达2.75×10-8ng/μL;TM-1基因为靶基因的检测灵敏性次之,最低检出量为0.028ng/μL; PvpA基因为靶基因的检测敏感性为0.275ng/μL。特异性试验结果显示,所建PCR体系与条件,只对鸡毒支原体可扩增出特异性条带,其他均无扩增条带。然后应用建立的方法对疫苗、鸡胚和鸡蛋等样品进行了初步检测,均可达到一定的检测效果。为建立一种广谱、精确的PCR检测方法,应用于鸡毒支原体的检测提供了实验依据。