黄芪多糖和皂苷综合提取及纯化工艺研究

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护肤领域内工业合成的抗氧化剂和功效成分越来越多的暴露出危害性,人们逐渐重视日常接触的护肤用品的安全性问题,寻找开发绿色安全的天然功能添加剂具有广阔的前景。本文以黄芪多糖和皂苷为目标成分,以奠定其在护肤品中的应用为目的开展研究,探索黄芪皂苷和多糖综合提取及纯化工艺。采用单因素考察和L9(34)正交实验法,讨论了料液比、提取温度、提取时间和提取次数分别对醇提皂苷效果和水提多糖效果的影响,确定了一组较佳的综合提取工艺。醇提步骤:75%乙醇;料液比1:10;提取温度为70℃,浸取时间2h,提取次数3。醇提后药材经烘干处理后再水提。水提参数:纯水;料液比1:6;提取温度100℃;浸取时间2 h;提取次数2。上述工艺的得率是:多糖为0.119g/g生药,皂苷为6.624 mg/g生药。考察不同因素对醇沉淀法纯化多糖水提液的影响,确定了醇沉工艺。醇沉工艺:溶液浓缩到1g生药/mL,醇沉3h,醇沉2次,乙醇添加至浓度达到80%。纯化后多糖溶液中的杂质去除率平均可以达到48.12%,多糖保留率平均可以达到82.29%。对比后选择木瓜酶处理多糖溶液,以单因素考察结合正交实验法研究最佳酶法除蛋白工艺。酶法除蛋白最佳工艺:溶液pH值调节为5,酶用量为5%,在50℃的恒温下酶解3 h,蛋白质清除率和多糖损失率分别为88.04%,12.56%。酶法处理后以Savage试剂处理1次,蛋白质清除率更高,去除率达到91.20%,多糖损失率为14.45%。对比静态吸附和解吸性能后选择D101树脂纯化黄芪皂苷,系统地考察了其上样和解吸条件,最佳上样条件:上样液浓度为1g生药/mL,上样量为45 mL,上样流速2 mL/min;最佳洗脱条件:先用120 mL蒸馏水洗脱杂质,洗脱流速为2 mL/min,杂质洗脱完成后,取100 mL 70%乙醇以2 mL/min的流速洗脱皂苷,收集洗脱液,洗脱液浓缩干燥后的黄芪皂苷粉末。经纯化后黄芪皂苷纯度为84.59%,回收率为87.52%。
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