【摘 要】
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目的探索PP1α对骨肉瘤Wnt/β-catenin信号通路途径的影响,为进一步研究PP1α在骨肉瘤发生、发展、凋亡过程发挥的作用提供基础。方法提取骨肉瘤U-2OS细胞总RNA, RT-PCR扩增P
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目的探索PP1α对骨肉瘤Wnt/β-catenin信号通路途径的影响,为进一步研究PP1α在骨肉瘤发生、发展、凋亡过程发挥的作用提供基础。方法提取骨肉瘤U-2OS细胞总RNA, RT-PCR扩增PP1α并克隆至pEGFP-N1真核表达载体,将重组质粒阳性克隆转染U-2OS细胞经过培养24到48小时后以Western blot检测其PP1α的蛋白水平表达。通过RT-PCR比较野生型和高表达PP1α细胞株Wnt/β-catenin信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclinD1的表达差异,观察PP1α对该信号通路的影响。结果成功构建真核表达载体pEGFP-N1-PP1α,转染U-2OS细胞后PP1α蛋白表达水平增强并且PP1α高表达细胞株β-catenin信号通路中β-catenin、c-myc、cyclinD1 mRNA表达水平呈时间依赖性增强。结论PP1α表达水平升高可能通过Wnt/β-catenin信号通路导致癌基因c-myc、cyclinD1表达水平升高,从而促进骨肉瘤发生。
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