神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元通过极化、迁移、形成突触联系来建立成熟的神经回路。浦肯野神经元是中枢神经系统中树突结构最为复杂的神经元,且分化后仍具有可塑性,主要与动作学习记忆相关。肿瘤转移抑制蛋白(Metastasis suppressor 1,MTSS1),被认为是一种肿瘤转移相关的肌动蛋白结合蛋白,近期有研究认为它参与神经元的极化和迁移。MTSS1蛋白在小脑神经元发育中受到调控。已有报道表明,MTSS1在大鼠出生后发育过程中呈现表达高峰并在成熟分化后维持较高表达,且主要分布于浦肯野神经元的胞体、轴突与树突。本论文工作主要针对神经元中MTSS1相互作用蛋白进行研究。首先通过免疫共沉淀结合质谱技术筛选到一系列MTSS1相互作用蛋白候选蛋白,并对Homer3和CRMP2做进一步研究。Homer是突触后密度蛋白家族成员之一,它是联系突触内细胞骨架蛋白、信号蛋白的重要物质。Homer3是一种信号转导调节蛋白,可以与多种靶蛋白结合,包括代谢型谷氨酸受体Ⅰ、三磷酸肌醇受体和N-甲基-D-天冬氨酸受体Shank蛋白。Homer3是浦肯野神经元中的Homer家族主要类型,广泛分布于其树突、轴突和胞体,但在树突棘中的信号最明显。本研究中免疫共沉淀与pull down试验均证实小脑中Homer3与MTSS1的相互作用。此外,小脑出生后发育时期的免疫印迹结果显示Homer3和MTSS1在大鼠小脑出生后0天、7天、14天、21天、56天表达水平的趋势一致。且MTSS1的免疫荧光图谱显示其定位于浦肯野胞体及轴突、树突,这与已有报道的Homer3的定位是一致的。脑衰反应调节蛋白 CRMP2(Collapsin response mediator protein family 2)是CRMP家族5种亚型之一,在发育中的神经系统高表达,并在轴突生长导向中发挥重要作用。海马神经元处于生长状态的轴突中含有丰富的CRMP2,它主要与轴突生长及极化有关。我们的结果显示MTSS1与CRMP2的相互作用仅在质谱鉴定和pull down实验中表明两者之间可能存在相互作用,尚需进一步证实。除免疫共沉淀之外,论文中还采用Blue-native PAGE开展对大鼠小脑和海马的突触体的蛋白差异研究,初步结果显示小脑和海马的突触体的蛋白质复合体存在明显差异。此外,我们也延续前期的工作,通过透射电镜技术进一步验证MTSS1可以进一步交联并改变α-辅肌动蛋白诱导的肌动蛋白纤维形态。