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随着转基因技术的不断发展与转基因作物种植面积的不断扩大,越来越多的转基因食品进入到我们的生活中,转基因食品的安全性问题逐渐引起各国的重视及公众的关注。因此,对于转基因食品的检测技术及检测方法成为了专家学者关注的热点。本文以大豆及其制品为实验研究对象,选择了CTAB法、胍-三氯甲烷法和试剂盒法分别对大豆种子、豆芽和豆浆粉DNA进行提取,根据所提DNA的含量及纯度选择出最佳的核酸提取方法用于后续实验分析。结果显示:在以大豆及其加工制品作为材料时,CTAB法相较于另两种方法所提取的DNA含量及纯度更高,适合于转基因食品检测中核酸的提取。本文建立了转基因作物中常见的pCaMV35S、tNOS、t35S、pNOS、pFMV35S、Hpt、CP4-EPSPS、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的定性PCR检测方法,相对检测下限可达0.1%~0.5%。建立了转基因作物中常见的pCaMV35S、tNOS、t35S、pFMV35S、Vip3Aa20、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的SYBR Green I荧光PCR检测方法,定性检测限(LOD)可达18~44拷贝基因组DNA或质粒DNA。建立了转基因玉米MON89034、转基因大豆MON89788、转基因玉米GA21的品系特异性TaqMan探针荧光PCR定量检测方法并绘制了标准曲线,其中MON89034品系特异性检测方法定量极限(LOQ)为45拷贝基因组DNA,标准曲线R~2值大于0.99,扩增效率为99.6%;MON89788品系特异性检测方法LOQ为50拷贝基因组DNA,标准曲线R~2值大于0.99,扩增效率为94.5%;GA21品系特异性检测方法LOQ为2拷贝基因组DNA,标准曲线R~2值大于0.98,扩增效率为104.8%,其标准偏差(SD)和相对标准偏差(RSD)都在允许范围内。本文用所建立的定性PCR检测方法对市场上散装的玉米、大豆加工制品进行pCaMV35S、tNOS、pFMV35S、CP4-EPSPS转基因外源元件的筛选检测,在9种不同的食品样品中豆腐块被检测出含tNOS、CP4-EPSPS转基因成分,并经过测序确证。本文基于不同的检测策略开发出了针对不同靶标序列的转基因PCR检测方法,并进行了实际样品的应用与验证,获得的研究结果为转基因食品的分子生物学检测方法提供实验室基础。