三七中皂苷类化合物的提取、水解及肿瘤细胞毒性研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:socks2010
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本论文以三七中的皂苷类化合物为研究对象,从三七中提取分离出总皂苷、原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷,模拟胃部环境使之在人工胃液中水解,并考察了不同时间点水解次生皂苷的肿瘤细胞毒性。   采用超声提取法结合萃取得到三七总皂苷,并利用大孔吸附树脂分离得到原人参二醇型和原人参三醇型皂苷,产率分别是4.3%和3.7%。利用UPLC-TOF/MS方法,对提取分离得到的三七总皂苷、原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷中的皂苷种类进行分析鉴定,共鉴定出21种皂苷,包括Rb1,Rc,Rb2,Rd,20(S)-Rg3,20(R)-Rg3,Rk1,Rg5,20(S)-Rh2,20(R)-Rh2, N-R1, Rg1, Re,20(S)-Rg2,20(R)-Rg2,20(S)-Rh1,20(R)-Rh1,Rg6,F4,Rk3,Rh4),并建立了标准曲线。   将三七总皂苷、原人参二醇型和原人参三醇型皂苷通过人工胃液水解,利用UPLC-TOF/MS方法鉴定三类皂苷水解后的次生苷,并进行定量分析,还考察了水解时间对原生苷及次生苷的含量变化的影响,发现7种原生苷的水解规律与对应的皂苷混合物中的原生苷水解规律相似,而二醇型和三醇型皂苷次生苷在三七总皂苷和相应类型皂苷混合物中水解规律不一致,可能由于存在着一定的皂苷间相互作用,影响了酸水解的过程。此外,酸水解的过程中S和R两种构型的转变存在一定的平衡,三种皂苷类化合物中的S-Rg2/R-Rg2,S-Rg3/R-Rg3,S-Rh1/R-Rh1和S-Rh2/R-Rh2的比值水解时间的延长而变小,证明了在酸水解过程中,有利于S-构型的次生皂苷向R-构型转化   论文还利用MTT实验研究了三种皂苷混合物及其各自水解产物的肿瘤细胞毒性,发现次生苷是产生肿瘤细胞毒性的主要物质,但是三种混合物的水解产物对癌细胞的细胞毒性并不相同,且不同时间点水解产物对癌细胞的抑制活性也发生变化:水解后0.25-1小时,原人参三醇型皂苷水解产物的肿瘤细胞毒性最强;0.5小时之后,三七总皂苷水解产物的肿瘤细胞毒性最强。
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