论文部分内容阅读
目的：探讨靶向血管内皮生长因子(VEGF)的siRNA下调VEGF表达后对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及凋亡相关基因survivin的影响方法：体外设计并合成靶向VEGF mRNA的siRNA,采用LipofectamineTM2000转染人乳腺癌细胞MCF-7,实验设空白对照组、空脂质体组、阴性对照SCR组、3个siRNA浓度梯度组(50、100、200nnmol/L),转染24小时后,AnnexinV/PI双染结合流式细胞仪测定细胞凋亡；半定量RT-PCR、细胞免疫组化技术检测转染前后MCF-7细胞survivin基因表达的变化。结果：靶向VEGF基因的siRNA转染MCF-7后,与空白对照组比较,50nmol/L组细胞凋亡率增加(p<0.05),100、200nmol/L组细胞凋亡率显著增加(p<0.01),但空脂质体组、阴性对照SCR组与空白对照组比较无统计学意义(p>0.05);survivin mRNA在各siRNA转染组表达较之空白对照组均下调(p均<0.05,其中100nmol/L和200nmol/L转染组p均<0.01),空脂质体组、阴性对照SCR组与空白对照组比较无统计学意义(p>0.05)；survivin蛋白表达水平在各浓度转染组下调(p均<0.05,其中100nmol/L和200nmol/L转染组p均<0.01),而与未处理组比较,阴性对照SCR组与空脂质体组差异无统计学意义(p>0.05)。结论：靶向VEGF基因的siRNA转染MCF-7后诱导细胞凋亡,且与转染剂量有一定依赖关系；其分子机制与凋亡相关基因survivin表达有关。