循环肿瘤细胞(CTC)检测技术分为体外检测和体内检测。体外检测方法通常会受到血液量的限制,而体内检测的载体材料,常常采用金属丝、化学纤维丝。由于丝、线承载力的限制,通常直径(>500μm)远远大于被捕获的目标细胞CTC(10-50μm),对于捕获CTC,载体丝线表现出了较大的空间位阻,严重影响捕获效率和检测灵敏度。据此,在本研究中,我们选择天然大分子-蚕丝丝素蛋白纤维作为载体,它具有柔软,较小的捕获空间位阻,易降解,易接枝等优点,拟实现高效捕获CTC。我们首先利用自由基聚合反应,将乙烯基单体丙烯酰胺(AM)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GM)共聚接枝上蚕丝,通过计算蚕丝的接枝率优化了 GM以及AM的接枝浓度,但是最后通过SEM表征发现,由于该反应大量接枝以及单体容易自聚,即便很小的接枝率,蚕丝表面也会堆积大量的大颗粒物,这样将会影响后续捕获。由于蚕丝是大分子蛋白,表面有大量的活性基团。利用PEBG在50℃条件下与蚕丝接枝反应6h,反应好的样本继续在25℃条件下和EDA反应14h,完成后,在pH～5、37℃条件下活化连接PAA2h,即得捕获载体。接枝过程中样本通过红外、ZETA电位、氨基比色法表征。结果表明,PEBG、EDA和PAA均成功接枝。通过SEM表征了接枝蚕丝的表面状态,在表面没有发现明显的聚合物堆积,说明表面接枝分布均匀。之后,将修饰了氨基的核酸适配体固载在被接枝的PAA上,实现了 CTC捕获器的构建。我们对捕获器进行了性能优化。通过改变接枝PAA分子量,发现随着PAA链的增长,其捕获器的细胞捕获数量随之增大,但分子量达到10万后,捕获数量趋于稳定。通过靶细胞的特异性捕获以及非特异性比较发现,接枝后用甘氨酸进行封闭其细胞特异性捕获率最高。通过不同捕获时间的试验发现,随着时间的增加,特异性捕获数量会增大,但达到30分钟后,细胞特异性捕获数量不再增加,而非特异性吸附量仍在上升,因此综合特异性捕获率,可以将捕获时间定为30分钟。通过实验证明,随着加入适体量的增大,细胞捕获量也随之增加,但当适体量达到l00pmol时,连接适体已达到饱和,细胞捕获量不再增加。可以发现,随着蚕丝数量的增大,比表面积增大,与细胞可接触位点增多,细胞捕获量随之增大。利用性能优化的捕获器,我们对捕获器的捕获能力和生物相容性进行了考察。当靶细胞密度减小时,捕获总量随之减小。当细胞密度极低,即500个/ml时,捕获细胞量仍有100～200个,表现出了 CTC的高效捕获能力。对于捕获的干扰,在全血中加入靶细胞,使细胞密度仍然为500个/ml,捕获细胞量并没有受到显著影响,表明本捕获器对靶细胞的捕获具有较强特异性,且不会受到干扰细胞的明显影响。另外,我们对捕获器的、与体内捕获相关的、非捕获的性能进行了评价,包括载体蚕丝的承载力、接触细胞毒性、浸提液细胞毒性、和溶血性。结果表明,所考察性能均表现良好,预示着该捕获器可以用于体内实验。