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研究背景及目的:子宫腺肌病(Adenomyosis,简称:AM)是以经量增多、经期延长以及逐渐加剧的进行性痛经为主要临床症状的妇科常见疾病之一,严重影响生育年龄妇女的身心健康及生活质量。该疾病的临床表现多种多样,虽然组织学上是良性的,但却具有增生、浸润及复发等恶性生物学行为。子宫腺肌病的发病机制至今尚未完全阐明,基底层内膜侵袭学说为广大学者所接受,除此之外遗传、免疫、雌孕激素及病毒感染等因素也发挥着重要的作用。目前越来越多的研究表明细胞免疫参与子宫腺肌病的发生、发展。T细胞免疫球蛋白和黏蛋白分子3(T cell immunoglobulin mucin molecule 3,简称:TIM-3)作为T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域家族成员之一,是表达于T细胞、DC细胞、NK细胞等细胞表面的一种重要的负性免疫调控分子。TIM-3对T细胞介导的细胞免疫应答具有免疫调节作用,其过度活化并对胞内感染、肿瘤免疫微环境、自身免疫病等不同类型的免疫应答产生重要影响。半乳凝素9(galectin-9,简称:Gal-9)是TIM-3最重要的配体,广泛存在于人体中非免疫细胞的表面,同样也在外周免疫细胞有所表达。细胞因子刺激下,Gal-9表达水平明显增高。TIM-3/Gal-9的过度激活,将抑制免疫微环境中T细胞的免疫活性,进而导致免疫耐受及免疫逃逸。目前越来越多的研究发现,该通路除了在免疫细胞中发挥作用,也在一系列的良恶性疾病组织中存在异常表达,例如黑色素瘤、骨肉瘤、肾透明细胞癌、宫颈癌等。据此提出以下假设:在子宫腺肌病的发生发展过程中,子宫内膜及其所在的局部微环境中TIM-3和Gal-9异常高表达,引起TIM-3/Gal-9信号通路异常激活,使局部微环境T细胞的免疫效应降低、衰竭,从而介导子宫内膜腺体及间质的肌层种植、生长。因此,本次研究拟从蛋白水平及RNA水平探究子宫腺肌病在位内膜及异位病灶中TIM-3及Gal-9表达情况,旨在为子宫腺肌病发生发展、临床检验及治疗提供新的免疫检查点。研究方法:收集15名子宫腺肌病女性患者的在位内膜及异位病灶组织标本,以及13名对照组患者的正常在位内膜组织标本,利用免疫组化方法及Western blot方法检测TIM-3及Gal-9蛋白的表达位置并进行半定量分析,同时利用RT-PCR的方法检测组织相关mRNA的表达水平。结果:(1)在免疫组化分析中,子宫腺肌病在位、异位内膜腺上皮细胞中TIM-3蛋白和Gal-9蛋白的表达均高于对照组子宫内膜。TIM-3蛋白在间质中几乎无表达,Gal-9蛋白在子宫腺肌病在位、异位内膜以及对照组子宫内膜间质的少量表达无明显差异,无统计学意义。(2)在蛋白质印迹分析中,TIM-3在子宫腺肌病在位内膜中的表达高于正常子宫内膜。子宫腺肌病在位内膜相比于对照组子宫内膜之间的Gal-9蛋白表达呈增高趋势,但未达到常规的统计学意义标准。(3)在RT-PCR方法中,子宫腺肌病在位子宫内膜中TIM-3和Gal-9相关mRNA表达高于正常对照组子宫内膜。结论:(1)TIM-3及其配体Gal-9在腺肌病在位及异位子宫内膜中的表达升高,提示TIM-3/Gal-9信号通路可能参与子宫腺肌病的发生、发展过程。(2)为子宫腺肌病的免疫治疗提供新的指导方向。