硫自养厌氧流化床膜生物反应器去除硝酸盐运行性能及分子生态学研究

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硝酸盐是进入地下水中最频繁的污染物。长期饮用硝酸盐含量超标的地下水,会导致高铁血红蛋白症,还具有致癌风险。地下水中硝酸盐的去除是个亟待解决的问题。相比于其他技术,硫自养生物反硝化被认为是高效和经济可行的技术方法,具有较好的应用前景。针对该技术在应用中存在的一些共性科学技术难题,本研究建立硫自养厌氧流化床膜生物反应器(AFB-MBR),旨在通过强化传质和提高硫磺利用率提高硫自养反硝化去除NO3--N的能力;考察影响硫自养反硝化过程的主要因子,通过15NO3--N稳定同位素示踪分析硫自养反硝化过程,探讨其反硝化终产物的分布及归宿;采用最新的分子生物学手段解析微生物群落结构,对反应体系宏观运行性能从微生物生态学角度进行微观解析,分析其对宏观运行性能的响应。   融合厌氧流化床和膜生物反应器的优点,开展利用AFB-MBR进行硫自养反硝化去除NO3--N,在进水NO3--N浓度为25-80 mgL-1,HRT为0.5 h时,其去除率达100%,未检测到NO2--N积累,单位体积处理负荷可达到4.04 g/L-d,为传统硫自养固定填充床反应器的7.1-20.2倍;通过定期添加硫磺,可保证反应体系内硫磺含量相对恒定,体系内颗粒物的平均粒径范围可控制在30-50μm;膜组件在免冲洗的情况下,可持续运行50天,定期清洗后可实现反应体系持续稳定运行;反应体系内SO42-生成量与NO3--N转化的相关系数接近其理论化学计量关系,表明NO3--N被完全转化;反应体系去除浓度低于30 mgL-1的NO3--N,出水SO42-浓度低于饮用水标准限值,通过添加甲醇成功构建同时异养和硫自养共存的反硝化反应模式,使该技术处理较高浓度NO3--N(≥30 mgL-1)而同时控制出水SO42-不超标成为可能。上述实验结果表明,AFB-MBR用于硫自养反硝化去除NO3--N可有效解决传统固定填充床传质速率和硫磺利用率低、微生物易流失等技术难题,具有明显的优势。   考察了硫自养反硝化影响因子及过程机制。硫磺添加量的实验结果表明,流化床的流化状态可显著提高硫磺的利用率;pH值是影响硫自养反硝化的一个主要因子,初始pH7.0-9.0利于反应的进行,而pH低于6会抑制反硝化反应,且导致NO2--N积累;NH4+-N对硫自养反硝化过程未产生显著影响,表明硫自养反硝化菌可将NO3--N作为唯一氮源进行反硝化去除,并转化合成为微生物自身的有机氮。采用15NO3--N稳定同位素示踪分析硫自养反硝化终产物分布及氮平衡。结果表明,硫自养反硝化的终产物是15N-N2、15N-N2O和15N-biomass,不同初始浓度15NO3--N(30-60 mgL-1)转化结果表明,15N-N2和转化为微生物体内的15N-biomass分别占15N总量的91.0-95.0%和6.5-12%,而15N-N2O则仅占15N总量的0.5-1%,该过程不会显著增加N2O的排放。   采用RT-PCR和454高通量测序分析硫自养AFB-MBR反硝化体系的功能基因和微生物群落。反硝化功能基因nirS和nosZ随反应体系的启动呈增加趋势,其基因拷贝数从从启动初期的6.3×1011个/gSS和1.5×109个/gSS分别增加到运行20天的7.58×1013个/gSS和7.13×1010个/g SS; nirS和nosZ基因拷贝数随反应体系处理NO3--N浓度增加而呈显著增加趋势,表明反硝化体系微生物群落对宏观运行性能的环境响应。454高通量测序结果表明,稳定运行阶段微生物种群结构具有较高程度的稳定性,该体系存在9个细菌门类,其中Proteobacteria和Chlorobi两大门类占微生物群落的90%以上;硫自养反硝化体系微生物在纲水平上主要集中在Betaproteobacteria、Chlorobi和Epsilonproteobacteria;优势属主要为Thiobacillus、no_rank_Ignavibacteriales和Sulfurimonas,其中Thiobacillus和Sulfurimonas被认为是最常见和优势的硫自养反硝化菌,广泛分布于自然生态和人工环境中,而Ignavibacteriales与绿硫菌(GSB)同属于Chlorobi门,可能在硫自养反硝化体系具有重要作用,这是首次发现在硫自养反硝化体系存在Ignavibacteriales优势属。
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