【摘 要】
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本论文以分离纯化绞股蓝皂苷得到绞股蓝皂苷单体为目的,对绞股蓝皂苷的分离、提取、纯化以及生物酶转化进行了研究。在研究中采用醇提法提取,树脂法进行初步分离纯化,再经硅
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本论文以分离纯化绞股蓝皂苷得到绞股蓝皂苷单体为目的,对绞股蓝皂苷的分离、提取、纯化以及生物酶转化进行了研究。在研究中采用醇提法提取,树脂法进行初步分离纯化,再经硅胶柱层析法进一步分离纯化。粉碎后的绞股蓝干草经75%乙醇反复浸提3次后,醇提液经石油醚脱脂、饱和正丁醇萃取、AB-8大孔吸附树脂脱糖、D-296离子交换树脂柱脱色后,制得绞股蓝总皂苷,提取率为0.1574%,皂苷含量为84.58%。采用静态法测定AB-8大孔树脂的吸附容量,吸附量达到33.57mg/mL。对绞股蓝粗皂苷经D-296离子交换树脂柱后的皂苷损失量确定进行了三次平行实验,得平均损失量为0.595mg/mL。硅胶柱层析法分离绞股蓝总皂苷,得到3种皂苷单体。在洗脱比例V(氯仿):V(甲醇)=9.5:0.5下洗脱至2700mL出现皂苷单体A;9:1下洗脱至1100mL出现皂苷单体B,洗脱至2700mL出现皂苷单体C。得率分别为2.6%、3.0%、5.2%。高效液相色谱检测各样品,相对峰面积比分别约为88.73%、93.11%、78.54%。以Absidia sp.g48菌所产的糖苷酶作用于绞股蓝总皂苷和分离所得的3个单体组分,结果显示,绞股蓝总皂苷中的皂苷单体A没有被转化;皂苷单体B有非常微量的转化水解;皂苷单体C的转化较为明显,部分糖基被糖苷酶转化。
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