比利时杜鹃(Rhododendron hybridum Hort.)组织培养及花发育的研究

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本研究以杜鹃花科杜鹃花属比利时杜鹃(Rhododendron hybridum Hort.)为研究材料,进行了生殖生物学及组织快繁两个方面的研究。利用传统的石蜡制片技术,对比利时杜鹃花芽分化、花器官分化、雄蕊瓣化及大小孢子发育等生殖生物学内容进行研究,较为全面的阐述了比利时杜鹃在生殖生长过程中的基本规律;以比利时杜鹃的茎段和茎尖为外植体,进行了组织快繁研究,基本建立了快繁体系,探讨了其结实率低的原因。所获得的研究结果如下:1.比利时杜鹃为顶生总状或伞形花序,从开花前2~3个月开始花芽分化,逐步发育形成花序原基,特别的是花芽发育至一定阶段,会进入休眠状态。比利时杜鹃的花芽分化有明显的向顶次序,即最幼的器官最接近顶芽。2.成熟花药一般具有四个花粉囊,孔裂,大部分花药出现了不同程度的变形,花粉出现了败育,花药壁发育属基本型,绒毡层为腺质绒毡层。小孢子母细胞经减数分裂形成正四面体形的四分体,小孢子形成后始终保留在四分体里,最后形成复合花粉粒,并且四个小孢子的分裂是同步的,但在一个药室中各四分体的分裂则不一定同步,且胞质分裂为连续型。成熟花粉为2-细胞型,四分体中小孢子分割出的生殖细胞的位置是恒定的,生殖细胞在外边,即远离四分体中心的一面,具有3个萌发孔,外形为球形或近球形,花粉粒表面或多或少具毛状物。3.雌蕊由6心皮组成,心皮内卷愈合为中轴胎座,但与一般的中轴胎座有很大的区别,其心皮不仅内卷而且进入子房室内,形成树突状结构,胚珠就着生在此结构之上,胚珠的数目相当多。柱头6裂,具乳突状结构,子房上位,6室,倒生胚珠,双珠被且发达,薄珠心,珠孔道狭长,成熟胚囊呈长方形。胚囊的发育类型属于蓼型。4.雄蕊发育初期完全独立,随着花蕾的发育大部分完全瓣化,少部分仅花丝瓣化,后期残留花药,着生在花瓣上面。花瓣第一层为无性花瓣,内层为有性花瓣,由雄蕊瓣化而来。5.组织培养中,最适宜的消毒处理为消毒剂采用0.1%升汞溶液,消毒时间为6 min;最适的愈伤组织诱导及继代培养基为改良MS+2-ip(6mg/L)+NAA(0.5mg/L)+Vc(100mg/L)的组合;不定芽的分化培养基为改良MS+2-ip(2mg/L)+NAA(0.1mg/L)+Vc(100 mg/L)的组合;丛生芽的诱导培养基为改良MS+2-ip(4 mg/L)+NAA(0.1mg/L)+Vc(100mg/L)的组合;最适生根培养基是1/3 MS+0.5 mg/L NAA+Vc(100mg/L)的组合;外植体生长的最佳pH值为5.2-5.3。
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