转抗虫基因小黑杨根系分泌物对土壤生态系统的影响

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目前,世界越来越多的国家应用抗虫、抗除草剂等转基因品种,人们开始关注转基因植物给环境带来的潜在影响。土壤是转基因植物赖以生存的环境,也是转基因植物影响较大的对象。为此,本文针对转Bt-蜘蛛神经毒肽蛋白融合基因小黑杨根系分泌物对土壤微生物种群及数量、土壤酶活性、土壤理化性质的影响,并检测外源基因的水平转移的可能性,为评价转基因植物目的基因的释放可能引起的生态环境风险提供技术资料,为今后进一步的研究和探讨转基因植物对环境的影响提供参考。本研究发现,转基因小黑杨种植七个月后的土壤与种植一个月后的相比较,转基因小黑杨的土壤中土壤酶活性均有不同程度的变化,土壤脲酶活性升高,而土壤磷酸酶和多酚氧化酶活性下降,其中,土壤磷酸酶活性下降幅度较大。试验表明转基因小黑杨对土壤酶活有一定影响,但是有的影响未达到统计上的显著水平或极显著水平(P<0.05或P<0.01),这可能说明土壤酶活受到转基因小黑杨根际分泌物的影响较小。本研究表明,种植转基因小黑杨后根系分泌物对土壤理化指标的影响较小,与对照相比较基本上均未达到显著差异水平(P>0.05),说明短时间内种植转基因小黑杨,其根系分泌物未对土壤理化指标造成显著性影响。种植一个月后,部分指标转基因植株与对照之间虽然存在显著性差异,但种植七个月后到达生长旺盛期时,除土壤水解氮外,其余土壤全磷、缓效钾、速效钾、无机碳、总碳、水溶性盐等土壤理化指标在转基因植株与对照之间差异均未达到显著性水平(P>0.05),因此本研究认为转基因小黑杨根系分泌物在短期内对土壤理化指标和土壤养分的影响是微乎其微的。但长期种植转基因小黑杨是否会对土壤理化指标造成影响还需要进一步探讨。本试验利用自然条件下盆栽种植的方法,对转基因植株根际附近距离主根1-5厘米,距离表层土4-7厘米处可培养的五大类土壤微生物——细菌、放线菌、真菌,固氮菌、纤维素分解菌进一步检测计数,研究种植转基因小黑杨根际附近微生物数量的变化,同时设非转基因小黑杨和空白土壤对照,试验初步证明转基因小黑杨的种植能够改变根系附近土壤微生物的数量,在种植初期时能够快速提高微生物的数量,种植一段时间后除了纤维素分解菌以外,微生物的数量趋向于稳定状态。同时,种植一段时间后转基因小黑杨根系附近的微生物数量略高于非转基因小黑杨根系附近的微生物数量,说明目的基因有可能提高土壤微生物的数量,从而提高土壤的肥沃能力。此外,从5个不同检测时期土壤微生物总量的比例来看,总体以细菌数量最多,因此,细菌是本研究中土壤微生物中的优势菌群。转基因小黑杨种植七个月以后,与对照相比,转基因处理的土壤细菌NPTⅡ抗性基因PCR阳性检测有所提高,从种植一个月后的6%—10%提高到种植七个月后的34%—46.67%之间,两者间差异达到显著水平(P<0.05)。在对目的基因(Bt-蜘蛛神经毒肽蛋白基因)进行PCR阳性检测中发现,种植一个月后未发现阳性结果,在种植七个月后在土壤细菌中检测到个别的阳性结果,其PCR阳性结果百分比仅为2%—5%,这说明极少数目的基因可能发生了水平转移;同时,Southerh杂交结果进一步证实这一结论。
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