【摘 要】
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目的氯乙烯(VCM)对人正常肝细胞(HL-7702)细胞染毒后,通过对G1/S关卡相关基因在mRNA水平表达的变化,探讨VCM对G1/S关卡的影响和可能的致癌机制。方法1.HL-7702细胞暴露于0.02
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目的氯乙烯(VCM)对人正常肝细胞(HL-7702)细胞染毒后,通过对G1/S关卡相关基因在mRNA水平表达的变化,探讨VCM对G1/S关卡的影响和可能的致癌机制。方法1.HL-7702细胞暴露于0.02mg/ml,0.05mg/ml,0.16mg/ml,0.32mg/ml和0.65mg/ml的VCM气体和空气对照组48h后,光学显微镜观察细胞的形态学变化；2.流式细胞仪检测HL-7702细胞周期和细胞凋亡情况；3.实时荧光定量PCR的方法检测VCM对HL-7702的细胞周期调控相关基因的mRNA表达。结果1.HL-7702细胞在染毒48h后,细胞随着染毒剂量的增大,贴壁细胞数量减少,细胞死亡数增多。2.染毒48h后,细胞周期G1期细胞增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05),G2期细胞无明显变化(P>0.05)。各染毒组细胞早期凋亡率随剂量增加而增加(P<0.01)。3.染毒48h后,P53、P21、CDK2、cyclinE、cyclinA、cyclinD1基因的表达量随染毒剂量的增加而增加,与对照组相比差别有统计学意义(P<0.05)。CDK4基因随染毒剂量的增大表达无明显改变(P>0.05)。P16基因的表达量随染毒剂量的增加而降低,与对照组相比差别有统计学意义(P<0.05)。4.CDK4与cyclinD1基因表达呈正相关关系(r=0.673,P<0.01)；P16与cyclinD1基因表达呈负相关关系(r=-0.635,P<0.01)。结论1.VCM可导致HL-7702细胞周期紊乱,细胞死亡数增多；2.VCM使HL-7702细胞周期中G1/S关卡的调控基因(P53、P21、P16、CDK2、cyclinE、 cyclinA、cyclinD1)表达发生变化,从而导致G1/S关卡功能受到影响。
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