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神经细胞粘附分子（Neural cell adhesion molecule，NCAM）属免疫球蛋白超家族类的细胞粘附分子，定位于神经细胞胞膜及胞浆，主要通过同源粘附作用与相邻的神经细胞发生粘附，也可与细胞外基质的肝素、硫酸肝素结合发生非同源性粘附。肿瘤细胞表面粘附特性的改变是肿瘤侵袭迁移的重要特性。神经细胞粘附分子的表达与胶质瘤的侵袭性生长密切相关，但NCAM表达与胶质瘤患者的预后关系国内外文献尚未见报道。 增殖细胞核抗原（poliferative cell nuclear antigen，PCNA）是分子量为36Kda的酸性核蛋白，是DNA多聚酶δ的辅酶，是肿瘤细胞DNA合成中必不可少的物质。PCNA的表达水平高低与胶质瘤的病理级别呈正相关，对胶质瘤中PCNA的表达水平的检测可有效地反映肿瘤增殖活性及恶性度。 本研究目的是以免疫组化（Envision）二步法对脑胶质瘤中NCAM及与PCNA表达的相关性进行研究，力图揭示胶质瘤的增殖活性与侵袭性生长之间是否存在内在联系，结合临床随访对NCAM评估临床预后的意义进行探讨。 浙大医学院硕士学位论文 材料与方法 一、病例材料： 采用浙江大学医学院附属第一医院1996年4月到2000年6月神经外 科手术切除的并经病理检查证实的胶质瘤标本48例。6例正常脑组织作阳 性对照，其中男性29例，女性19例，年龄1171岁，平均年龄40．73岁。 由两位病理学家以双盲法按Kernohan胶质瘤分级法对其进行分级，其中I 级4例，11级22例，Ill级15例，IV级7例。本实验对所有48例胶质瘤患 者均进行了随访，随访时间为4—36个月，平均为10．11月，回访43例，失 访5例。 二、兔疫组化染色方法： 采用免疫组织化学 DAKD EnVision’”二步法，以正常脑组织作 NCAM阳 性对照，以缓冲液代替一抗、二抗作阴性对照。400倍显微镜下观察，NCAM 染色结果判定以细胞膜及细胞浆出现棕黄色高出背景色为阳性细胞，PCNA 染色结果判定以细胞核出现棕黄色高出背景色为染色阳性细胞。随机选择10 个高倍视野，计数1000 个肿瘤细胞，计算出阳性细胞所占百分比，分别为 NCAM标记主数和 pCNA增殖指数。’三、统计方法： NCAM、PCNA 的表达与病理分级之间的关系用方差分析。NCAM、PCNA 与 存活率之间的关系用k方检验。NCAM、PCNA 与病理分级之间的相关性分析 采用线性回归相关性检验。 结·，果 对照组 NCAM－PI为 61．67i22．29。表达阳性率为 100％I。11级胶质瘤中 NCAM－PI分别为 45．00土23．80和 39．77士13．93，表达阳性率为 100％，对照 组与1、11级胶质瘤间比较NCAM表达无显著性差异（P＞0．05），1、11级胶 质瘤间比较NCAM表达无显著性差异（P＞0．05）， ffilll级胶质瘤组NCAM－PI为 23．67i23．34，表达阳性率 80．00％（12／15）。 IV级胶质瘤组 NCAM－PI为 7．14is．09，表达阳性率 57．10％（4／7）。Ill、IV级 3 浙大医学院硕士学位论文胶质瘤组与对照组相比 NCAM表达有显著性差异（P（．05），Ill、IV级胶质瘤相比无显著性差异（P＞0．05）。将1级与＊级胶质瘤组合并作为低级别胶质瘤，Ill、IV级胶质瘤组合并后作为高级别胶质瘤组，两者进行比较发现有显著性差异（P＜0．05）。说明 NCAM的表达与胶质瘤病理分级相关，可反映胶质瘤的侵袭性高低。 正常对照脑组织中PCNA均为阴性表达，PCNA在各级别胶质瘤中均有不同程度的表达。I级胶质瘤中 PCNA－PI 为 27．50 t 10．35，与正常对照比较有极显著差异（P（．01）。11级胶质瘤组PCNA－PI为29．77f9．31，与正常对照比较有极显著差异（P（0．01）。Ill级胶质瘤组PCNA－PI为59．33士9．61，与正常对照比较有极显著差异（P＜0．01）。IV级胶质瘤组PCNA－PI为77．14上7．55，与正常对照比较有极显著差异（P＜0．01）。I级胶质瘤与＊级胶质瘤比较无显著性差异（P）0．05）。Ill级胶质瘤组与IV级胶质瘤组比较有显著性差异（卜（．05）。二级胶质瘤与＊级胶质瘤合并后作为低级别胶质瘤分别与＊、IV级胶质瘤组比较均有极显著差异（P＜0．of）。 将所有入选胶质瘤病例的NCAM－PI、PCNA干I 对病理级别进行线性回归发现病理级别与NCAM存在负相关，与PCNA存在正相关。而NCAM与PCNA存在负相关，均有统计学意义（P＜0．05）。 术后随访资料表明不同病理级别之间的半年存活率存在显著性差异（P（0．05）。据NCAM表达的不同进行生存率分析，以NCAM平均数为限分为NCAM高表达、低表达组。两组间生存率分析表明有显著性差异。以同样方法按PCNA表达不同进行生存率分析也表明PCNA不同表达组间有显著性差异。表明NCAM