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核糖体失活蛋白(ribosome—inactivating proteins，RIPs)是广泛存在于植物中的一类毒蛋白，它能对真核生物和原核生物核糖体大亚基进行脱嘌呤作用，从而破坏核糖体结构，抑制蛋白质的生物合成。
望江南核糖体失活蛋白基因(Cassin)是从望江南(Cassia occidentalis L.)中分离到的一种新的Ⅰ型核糖体失活蛋白基因，该基因具有核糖体失活蛋白的保守结构域，推测可能具有RNA N—糖苷酶活性活性，能够失活核糖体。已经证明非转基因烟草相比，转Cassin基因的烟草对TMV的抗性有明显的提高。
本研究是在前人工作的基础上进一步检测转Cassin基因烟草的抗病性。接种Cucumber mosaic virus(CMV)和茄科青枯菌(Ralstonia solanacearum)之后的转基因烟草发病时间延迟，病情指数显著降低，症状明显减轻。
为了进一步研究Cassin的基因功能，本研究根据全长序列设计了去除信号肽的引物，将编码Cassin基因成熟蛋白的基因序列克隆到原核表达pET28b(+)上，构建成带有组氨酸标签的原核表达载体pET28—cassin，并转化到高效表达菌株Escherichia． coli Rossetta(DE3)中；然后在37℃、1mmol IPTG的诱导条件下诱导1—5 hr，诱导产物用SDS-PAGE分析表明，Cassin基因主要以包涵体的形式高水平表达。包涵体变性后用Ni2+树脂亲和层析法对融合蛋白进行了纯化，获得了高纯度的融合蛋白。
纯化的蛋白经逐步透析复性，免疫兔子，制备了兔抗血清。得到的抗血清用间接ELISA法测定的效价为1:131072，westernblot检测结果说明抗血清具有较好的特异性，能与目的蛋白发生特异抗原，抗体识别反应。
复性的融合蛋白对9种真菌菌丝生长抑制实验表明，融合蛋白能特异地抑制多种真菌菌丝生长，其中对香蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)抑制作用最强，其次为禾谷镰刀菌(Fusarium gramineaum)，胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides(Penz．)Sacc．)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)，而对玉米弯孢叶斑病菌(Curvularia lunata(Walk) Boed)、大丽轮枝菌(Verticilliu dahliae Kleb)没有明显的抑制作用。