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东亚小花蝽(Orius sauteri)是田间重要的捕食性天敌昆虫之一,本研究室多年监测大豆田天敌昆虫发生情况的结果表明,在东北地区,小花蝽具有发生早、田间控制害虫时间长的特点,是早期控制蓟马、蚜虫的主要天敌,是一类很有利用价值的天敌昆虫。目前,我国在农事操作、田间管理过程中,由于化学农药的施用,大大影响了小花蝽固有的的生物防治效果。为了更好的减少农药的使用,降低环境危害,本文着重研究了田间外界因素对东亚小花蝽的捕食功能与体内抗逆蛋白表达水平的影响,为更好的利用天敌昆虫进行生态农业提供参考。本试验选取东亚小花蝽成虫为供试材料,对其于不同温度、不同农药梯度下捕食量情况、种内竞争捕食功能参数等进行分析研究,并通过提取虫体总RNA、利用RT-PCR和RACE技术,克隆得到热休克蛋白基因hsc70、hsp70、hsp90基因全长,经原核表达及Western-blot验证了克隆基因的正确后,采用Real-time PCR技术,分析了在不同温度(10℃、18℃、26℃、34℃、42℃)下、不同高效氯氰菊酯浓度(CK、LC25、LC50、LC75)下,及这两种因子共同胁迫作用下,对东亚小花蝽体内hsc70、hsp70、hsp90的表达量水平影响。通过试验分析确定了东亚小花蝽最适捕食温度为26℃,东亚小花蝽成虫处理一头大豆蚜所需的时间(Th)以26℃时最短(0.0549 d),18℃时最长(0.1155 d);捕食上限以26℃时最大(18.2头),18℃时最小(8.65头);瞬间攻击率(a)以26℃时最大(1.3122),34℃时最小(0.6160)。在供试农药浓度梯度范围内,东亚小花蝽成虫处理一头大豆蚜所需的时间(Th)以0 mg/L时最短(0.0549d),140 mg/L时最长(0.15 d),其中在农药梯度在40 mg/L下时,处理一头大豆蚜所需的时间(Th)为0.0824 d,是0 mg/L的1.5倍;捕食上限40 mg/L下为12.1359,约是0 mg/L的2/3,且随着农药浓度的增加捕食上限也大幅度下降;农药胁迫下,40 mg/L下为0.3845,约是0 mg/L的2/7,且随着农药浓度的增加瞬间攻击率(a)也大幅度下降。本试验获得了hsc70、hsp70、hsp90基因全长分别2 207 bp、2 286 bp、2 433 bp,GeneBank登录号分别为:KJ573768、KJ867518、KJ573769。预测分子量为71.57 KDa、69.82 KDa、83.05KDa,与SDS-PAGE及Western-blot所得结果相吻合。Real-time PCR结果表明,在供试温度梯度下,hsc70表达量显著升高,分别是26℃的7~23倍,其各处理之间差异显著(P<0.05);hsp70表达量也显著升高,最高可达到26℃的38.69倍。当温度升高或降低波动较范围较小时,东亚小花蝽体内hsc70、hsp90表达量上调倍数比hsp70表达量大,而当环境温度升高或降低波动剧烈时,其体内的hsp70表达量比hsc70、hsp90更容易被诱导升高,表现为hsp70表达水平是26℃下的30~40倍。在供试农药处理梯度下,以LC25浓度处理虫体与对照组相比较,hsc70大量表达,而hsp90表达量下降;10℃,42℃下,农药处理抑制的hsp70转录,表达量水平下降;随着农药浓度的增加hsp70、hsp90表达量显著升高,而hsc70表达量下降。本试验结果说明东亚小花蝽对一定温度范围内对高温、低温具有抗逆性,然而农药的施用会降低其体内抗逆蛋白HSPs的表达,从而降低了对不良自然环境的适应,影响其正常的生物防治效果。因此,利用捕食性天敌东亚小花蝽在进行田间释放、生物防治的过程中,应避免或降低农药的施用,从而达到利用天敌昆虫应有的生物防治效果,使农产品具有更高的经济价值。