乳腺癌血清肿瘤标志物适配体的筛选及其检测

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自20世纪70年代末,全球乳腺癌发病率呈上升趋势。乳腺癌已成为当前社会的重大公共卫生问题。提高乳腺癌的早期诊断,实现有效筛查,结合腺癌综合治疗,可提高乳腺癌治疗疗效。癌症病例中,许多蛋白质作为信号蛋白参与细胞分化和细胞生长等多种功能,同时可作为致癌基因并动员细胞转化。认为这些蛋白分子是癌症检测和治疗领域的一个有吸引力的靶向蛋白,因此,这一靶向蛋白现在引起进行广泛的研究和调查。将适体定义为小核酸分子,由一个命名为SELEX的程序的组合库分离提供。适体可以通过在目标分子中嵌入特定数目的特定的、特定的和特定的接触点来限制结合。研究目的:利用靶标替换消减SELEX技术从乳腺癌血清中筛选肿瘤标志物核酸适配基。研究内容:利用乙腈法去除血清中高丰度蛋白;用羧基琼脂磁珠作为载体结合乳腺癌血清蛋白;再利用靶标替换消减SELEX技术,经过9轮筛选,获得了乳腺癌血清特异核酸配体的二级文库。结果:获得了乳腺癌血清特异性核酸配体的ssDNA二级文库。这一ssDNA文库能够特异性结合乳腺癌血清靶向蛋白。在每一轮的选择过程,数字凝胶成像系统和实时定量PCR技术检测目标DNA的浓度和规范,直到目标ssDNA富集达到最高点。到目前为止,筛选完毕。
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