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双丹类制剂由丹参和牡丹皮配伍组成,两者相须为用,具有活血散瘀、通络止痛的功效。现代药理学研究表明,双丹制剂在治疗心血管疾病方面发挥着重要作用,然而其疗效机制不甚清楚。本论文以丹参与牡丹皮(2:1)配伍的水提液(双丹提取液)为研究对象,采用基于HPLC-MS技术的代谢组学方法,从体外化学成分变化和体内代谢物应答两方面展开研究,揭示双丹提取液抗急性心肌缺血作用的物质基础和疗效机制。(1)采用HPLC-MS技术分析双丹提取液中的化学成分,探究丹参和牡丹皮配伍后的化学成分变化。主要包含源于丹参中的丹参素、咖啡酸、迷迭香酸、原儿茶酸、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、丹酚酸E、新绿原酸、紫草酸等;以及源于牡丹皮中的肌醇、蔗糖、柠檬酸、没食子酸、氧化芍药苷、牡丹苷B、牡丹苷D、牡丹苷E、芍药苷、没食子酰芍药苷、异牡丹皮苷H、苯甲酰芍药苷、牡丹皮苷J等。更为重要的是,在双丹提取液中新发现了一种环烯醚萜苷类化合物,暂且推断为Lamiide,该物质广泛分布在唇形科植物中,具有抗氧化等功效。该物质是否在双丹制剂治疗心肌缺血疾病方面发挥关键作用,还有待于进一步研究。(2)皮下注射异丙肾上腺素(ISO,100 mg/kg)诱导大鼠急性心肌缺血损伤的病理模型,检测血清中LDH、CK、CK-MB和AST等临床生化指标进行验证。采用基于HPLC-MS的代谢组学方法,探索丹参、牡丹皮单煎液和配伍合煎液的抗心肌缺血效应。经统计分析发现,与正常组相比,模型组动物血清中54个代谢物(花生四烯酸、磷酰胆碱、6-磷酸葡萄糖酸等),尿液中38个代谢物(马尿酸、瓜氨酸、尿嘧啶等),粪样中23个代谢物(硬脂酸、L-天冬酰胺、海藻糖等),组织样本(心、肝、脑、肾)中44个代谢物(胸腺嘧啶、二十二碳六烯酸、鞘氨醇等)发生了显著性变化。给予双丹提取液后,上述这些代谢物发生了不同程度地调整,表明这些代谢物与双丹抗急性心肌缺血作用密切相关,涉及到氨基酸代谢、神经递质代谢、能量代谢、脂肪酸代谢和糖类代谢等代谢通路,这为阐释双丹复方制剂保护心肌缺血的作用机理提供了实验依据。