【摘 要】
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背景:LRR蛋白是富含亮氨酸重复序列基序的蛋白,广泛表达于各种生物体中,参与许多生理过程并发挥重要的作用。在免疫系统中,TLRs是研究最为清楚的一类LRR蛋白,人和小鼠中目前已经发
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背景:LRR蛋白是富含亮氨酸重复序列基序的蛋白,广泛表达于各种生物体中,参与许多生理过程并发挥重要的作用。在免疫系统中,TLRs是研究最为清楚的一类LRR蛋白,人和小鼠中目前已经发现了13种TLRs,它们主要表达在各种髓系起源的固有免疫细胞以及肠道、呼吸道等相关组织的粘膜上皮。在这些部位,它们分别识别不同的PAMPs,发挥固有免疫介导的抗病原体的免疫应答反应,同时它们还可以激活获得性免疫,进而发挥更有效的免疫应答反应。
目的:LRRC19是实验室鉴定的一个新跨膜蛋白,此课题目的是确定LRRC19在不同组织中的表达分布,以及初步探讨其在免疫系统的功能。
方法:利用半定量PCR和原位杂交来确定LRRC19的组织表达分布;通过生物信息学分析小鼠中所有LRR蛋白,找出与LRRC19进化比较同源的已知功能的蛋白;通过尿道逆行感染模型研究正常条件下表达的LRRC19在肾脏的功能;利用流式分析确定LRRC19对免疫细胞群分化发育等的影响;ELISA检测细胞因子确定LRRC19对髓系细胞在PAMPs的刺激情况下释放细胞因子的影响;体外刺激脾细胞、流式分选不同细胞群,调查炎症条件下特异表达LRRC19的细胞群。
结果:通过半定量PCR和原位杂交发现LRRC19主要表达在肾小管上皮细胞和肠粘膜;生物信息学分析显示LRRC19和TLRs在进化上比较同源;尿道感染模型证实LRRC19在肾脏具有抗感染的功能,能够调控炎症因子以及趋化因子的释放进而影响炎症细胞的侵润;通过ELISA检测细胞因子发现LRRC19的敲除对髓系细胞释放的细胞因子有很明显的影响,最后利用体外刺激脾细胞,发现LRRC19在免疫系统是一个诱导表达的基因,经流式分选最终确定炎症条件下LRRC19能在CD11b+的细胞群表达。
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