芪化物是植物多酚的一种,植物体在受到逆境环境后,自身产生的一种植物抗毒素,存在于葡萄,花生等植物的根、茎、叶、果实等组织中,并且研究发现,芪化物家族成员有各种各样的功能活性,如抗氧化,抗衰老,抗炎等。本实验主要以芪化物为主要研究对象,通过作用于SD大鼠原代神经细胞,验证芪化物是否具有神经保护作用,如果有神经保护作用,探索其构效和量效关系以及芪化物对神经保护作用的作用机制。第一部分主要是建立Ap诱导的原代神经细胞损伤模型。此部分从16-18天孕龄的SD母鼠中取胎鼠脑神经细胞,进行体外培养,以Aβ25-35为诱导剂,神经细胞存活率为评价指标,分别对Aβ25-35老化天数,温度条件,损伤剂量及与细胞孵育时间进行分析比较,结果发现Aβ25-35溶解在无菌PBS (pH7.4)溶液中,37℃C老化14天后,选择20μmol/L浓度与细胞作用24h建立的细胞损伤模型能够满足后续试验,模型稳定可用。第二部分主要以不同羟基数的芪化物(反式二苯乙烯,反式4-羟基芪,反式白藜芦醇和白皮杉醇)为研究对象,分析这四种芪化物对乙酰胆碱酯酶活性的影响,本身抗氧化活性的差异,对原代神经细胞保护作用及作用机制。结果显示因化学结构不同,物质的功能活性存在差异,对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用,除白藜芦醇外,其他三个芪化物存在随着羟基数量增多对酶活性抑制效果增强的构效关系。四个芪化物均有较强的抗氧化能力,能够有效的清除DPPH, NO,·OH自由基,四个芪化物也均能有效的抑制细胞内ROS的产生,并且抑制效果和体外对.OH自由基清除规律一致。四个芪化物对Aβ25-35诱导损伤的神经细胞有保护效果,其作用机制是通过激活PI3K/Akt/Bad通路以及其下游的线粒体通路和Caspase通路以达到抑制细胞凋亡的效果。第三部分主要以不同取代基的芪化物(反式云杉新苷,紫檀芪,3,4’5-三甲氧基芪,ε二聚体和6二聚体)为研究对象,与白藜芦醇对比分析这五种芪化物对乙酰胆碱酯酶活性的影响,本身抗氧化活性的差异,对原代神经细胞保护作用及作用机制。结果显示因取代基种类和数量的不同,芪化物的功能活性存在显著差异,对乙酰胆碱酯酶活性有抑制作用,以白藜芦醇为基本结构进行取代,取代后单体芪化物的极性越弱对酶活的抑制能力越强,二聚体中ε-二聚体抑制活性强于6-二聚体。五个芪化物均有较强的抗氧化能力,能够有效的清除DPPH, NO,·OH自由基,在有羟基存在的单体芪化物中,羟基数量越多对DPPH自由基的清除能力越强。对·OH自由基清除能力最强的是δ-二聚体,清除能力可能和取代基的位置相关。五个芪化物均能有效的抑制细胞内ROS的产生,并且抑制效果和体外对·OH自由基清除结果一致。以反式云杉新苷和紫檀芪为代表分析其对神经细胞的保护作用及作用机制发现,二者对诱导损伤的神经细胞有保护效果,但作用机制与白藜芦醇不同,反式云杉新苷仅激活了线粒体途径而紫檀芪仅激活了Caspase途径,其他的死亡受体途径及PI3K/Akt/Bad途径在二者中均未激活。