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目的本研究通过观察不同应激暴露对小鼠妊娠结局的影响,探讨妊娠前应激暴露导致不良妊娠结局可能的分子机制,为妊娠前应激暴露对后续妊娠结局的影响提供研究基础;通过临床问卷调查分析生育压力对宫腔内人工授精（intrauterine insemination,IUI）妊娠结局的影响。研究方法动物实验:将80只BALB/C雌鼠随机分为四组,分别为:（1）对照组,不予任何处理;（2）皮质酮（CORT）处理组,给予腹腔注射皮质酮20mg/Kg/d;（3）悬尾（tail suspension,TS）组,每日不定点悬尾6分钟;（4）限制肢体活动组,即制动（physical restriction,PR）组,将小鼠每天置于简易改造的50ml离心管中8小时,限制其生理活动。应激暴露连续24日后,通过强迫游泳实验检验小鼠应激行为;利用酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清应激相关指标。应激小鼠造模成功后,待小鼠休息2周合笼,观察比较四组小鼠妊娠结局。同时收集四组小鼠不同妊娠时期胎盘组织,对小鼠蜕膜自然杀伤（decidual natural killer,dNK）细胞进行过碘酸-雪夫（PAS）染色和利科斯双花凝集素（dolichos biflorus agglutinin,DBA）免疫荧光染色观察其形态和数量是否发生改变,免疫荧光和免疫组化分析胎盘蜕膜组织中糖皮质激素受体（glucocorticoidreceptor,GR）和血清/糖皮质激素诱导激酶 1（serum and glucocorticoid-regulated Kinase,SGK1）以及颗粒酶 B（granzyme B,GzmB）的表达情况。临床问卷调查:招募于2019年1月至2021年5月期间在苏州大学附属第二医院生殖医学中心准备行IUI治疗的女性不孕患者作为研究对象。将一般信息问卷、生育问卷调查表（Fertility Problem Inventory,FPI）、压力反应问卷（Stress Response Questionnaire,SRQ）和特质应对问卷（Coping Style Questionnaire,CSQ）发放给患者完成,同时追踪记录患者临床妊娠结局。结果1动物实验部分1.1 应激小鼠造模成功与对照组比较,三组应激暴露的小鼠在连续应激暴露的第15天开始体重显著降低（P＜0.05）;强迫游泳实验显示CORT组和悬尾组的不动时间明显长于对照组（P＜0.05）;三组应激暴露组小鼠血清CORT和ACTH水平均显著高于与对照组（P＜0.05）。1.2 CORT组小鼠胎盘组织dNK细胞及DBA+dNK细胞密度均降低PAS和DBA免疫荧光染色显示dNK细胞仅存在于蜕膜组织中,E11.5-14.5天CORT组dNK细胞和DBA+dNK细胞的细胞密度均明显低于对照组（P＜0.05）。1.3 E11.5-14.5天CORT小鼠胎盘组织GR表达增多和SGK1表达减少免疫组织化学半定量IOD分析表明,CORT组蜕膜区和迷路区GR阳性染色均明显多于对照组（P＜0.05）;CORT组小鼠胎盘蜕膜组织中SGK1阳性染色明显低于对照组（P＜0.05）。1.4 E11.5-14.5天CORT组小鼠胎盘组织DBA+dNK细胞中细胞核GR表达增加、细胞浆GzmB表达减少CORT组GR+DBA+dNK细胞数目占DBA+dNK细胞数目百分比显著高于对照组（P＜0.001）;CORT组GzmB+DBA+dNK细胞数目占DBA+dNK细胞数目百分比明显低于对照组（P＜0.05）。2临床问卷调查部分影响不孕症相关压力的社会人口学特征因素主要为教育水平、职业状况和家庭月收入（P＜0.05）。压力反应和消极应对方式评分与不孕相关压力评分呈正相关（P＜0.01）。FPI压力评分中,性关注压力评分每升高1分,临床妊娠率下降5%（OR=0.95,95%CI=0.90～1.0,P＜0.05）。结论妊娠前应激暴露对后期妊娠结局的不良影响,可能是通过GCs-GR-SGK1通路,影响NK细胞的增值及细胞活性引起母胎界面微环境改变而导致不良妊娠结局。我们发现压力反应和消极应对方式评分与不孕相关压力评分呈正相关,性关注的压力评分与临床妊娠率负相关。本研究将为妊娠前应激暴露对后续妊娠结局的影响提供研究基础。