植物醛酮还原酶是植物体中重要的解毒酶,在植物防御非生物胁迫中起关键作用。本实验室发现正常和机械损伤的甘蓝释放苯甲醛,而小菜蛾为害后甘蓝释放的挥发性物质中没有苯甲醛而有苯甲醇,因此醛酮还原酶可能在植物应对害虫为害中发挥作用。本研究利用qRT-PCR技术分析甘蓝受小菜蛾胁迫后甘蓝醛酮还原酶基因表达量的变化,结果发现甘蓝在受到小菜蛾取食2h后,BoAKR1、BoAKR2这2条基因表达量都显著提高,且都在小菜蛾取食10 h后迅速增加,并达到最大值,表明BoAKR1、BoAKR2基因与小菜蛾取食胁迫相关；在受机械损伤后,BoAKR1、 BoAKR2基因表达量立即显著上升,且BoAKR2基因表达量在受机械损伤0h表达量最高,而BoAKR1则是在受机械损伤4h后达到最大值,这表明BoAKR1、 BoAKR2基因与甘蓝对机械损伤的应急反应相关,且BoAKR2基因的相关性更密切；BoAKR3、BoAKR4基因表达量在甘蓝受机械损伤后无显著变化,但在受小菜蛾取食10h后这2条基因表达量显著提高,表明BoAKR3、BoAKR4基因与甘蓝受机械损伤无关,但与小菜蛾取食胁迫相关；无论甘蓝是受小菜蛾取食还是受机械损伤,BoAKR5基因表达量都无显著变化,表明BoAKR5基因与小菜蛾取食胁迫以及机械损伤胁迫无关。同时,本研究将BoAKR1转入含有CaMV35S启动子的pCAMBIA1301载体中,构建了pCAMBIA 1301+BoAKRI植物过表达载体,并成功将该植物表达载体导入甘蓝植株中；将BoAKR1正反向基因序列与pJM007克隆载体相连,构建重组质粒pJM007+RNAi (BoAKR1),再将含有启动子+BoAKR1(-)+intron+BoA KR1(+)+终止子元件从pJM007+RNAi(BoAKR1)重组质粒中切下,并与植物表达载体pCAMBIA 1301连接,形成pCAMBIA 1301+RNAi (BoAKR1)植物RNAi抑制表达载体；设计针对BoAKR1基因的gRN A靶点序列,构建CRISPR/Cas9植物表达载体。比较5种的NaClO消毒浓度下甘蓝种子污染率,结果显示种子污染率大小为4%NaClo> 6% NaCIO> 8% NaCIO> 10% NaClO-12% NaClO,确定甘蓝种子消毒最佳NaClO浓度为10%；对比6种愈伤诱导培养基,配方为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.45 mg/L NAA+3%蔗糖+0.7%琼脂粉中的甘蓝外植体第7d开始形成愈伤组织,在第20d,40个外植体中共有26个形成愈伤组织,这在6种愈伤组织诱导培养基中表现最好。本研究为进一步研究甘蓝醛酮还原酶基因在甘蓝与小菜蛾互作中的作用提供基础。