AMPK-NF-κB通路介导的三七总皂苷抗心肌缺血再灌注炎症反应的机制研究

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目的:  观察三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的心肌保护作用并探讨其通过AMPK-NF-κB通路抗炎机制。  方法:  82只SD大鼠,随机分为6组:假手术(Sham)组(n=11)、模型(I/R)组(n=15)、PNS组(n=12)、AICAR组(n=15)、Compound C(CC)组(n=14)、BAY-117082(BAY)组(n=15)。对大鼠实施结扎冠脉左前降支40min,再灌60min手术,制作大鼠心肌缺血再灌注模型,检测心功能指标,并行心肌光镜观察和MPO活力测定,western blot法测定胞浆p-AMPK、p-IκBα蛋白含量,用western blot法和免疫荧光法检测心肌细胞核内p-NF-κB水平,分别用RealTime-PCR法、ELISA法检测心肌组织TNF-α和MCP-1基因转录与蛋白表达水平。  结果:  1.PNS能明显减轻再灌注心脏DP、mLVSP、±dp/dt max降低(p<0.05~0.01)和mLVDP、t-dp/dtmax的增大(p<0.05~0.01),改善再灌后大鼠心脏血流动力学;减轻I/R心肌组织病理改变。  2.PNS能降低大鼠MIRI心肌组织MPO活性(p<0.001),减轻中性粒细胞浸润和炎症反应程度;减少I/R后心肌TNF-α和MCP-1基因转录(p<0.01~0.001)和蛋白表达(p<0.05)。  3.PNS能升高再灌注心肌胞浆p-AMPK含量(p<0.01),作用类似AMPK激活剂AICAR。  4.PNS能降低再灌注心肌胞浆p-IκBα、核内p-NF-κB量(p<0.05),免疫荧光结果显示PNS能明显抑制再灌注心肌p-NF-κB入核,作用与NF-κB抑制剂BAY-117082相同。  结论:  PNS能促进缺血再灌注心肌收缩与舒张功能的恢复,减轻心肌组织形态学病理改变,其机制是PNS激活AMPK,抑制IκBα-NF-κB通路信号转导,减少p-NF-κB入核及其下游炎症因子(TNF-α、MCP-1)基因转录和蛋白表达,从而减轻I/R心肌炎症反应。因此调控AMPK-NF-κB通路是PNS抗MIRI炎症反应作用的重要机制之一。
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