【摘 要】
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背景:C-反应蛋白（CRP）是一种典型的急性期蛋白,在组织发生损伤、感染时其在血液中浓度迅速升高,是炎症反应的非特异性标志物。同时,CRP在固有免疫和后天免疫中起到关键的调节作用,直接参与了很多慢性或急性炎症相关疾病的调控。溃疡性结肠炎（UC）是一种炎症性肠病,发病率在世界范围内逐年升高,持续时间长并反复发作,严重影响患者正常生活。有报道发现,CRP表达水平的高低与很多药物对UC治疗效果的好坏具有
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背景:C-反应蛋白（CRP）是一种典型的急性期蛋白,在组织发生损伤、感染时其在血液中浓度迅速升高,是炎症反应的非特异性标志物。同时,CRP在固有免疫和后天免疫中起到关键的调节作用,直接参与了很多慢性或急性炎症相关疾病的调控。溃疡性结肠炎（UC）是一种炎症性肠病,发病率在世界范围内逐年升高,持续时间长并反复发作,严重影响患者正常生活。有报道发现,CRP表达水平的高低与很多药物对UC治疗效果的好坏具有显著相关性,但是CRP是否直接参与调控UC的进展缺乏有力报道。本研究旨在揭示CRP在UC小鼠模型中的作用,对今后UC的研究与治疗提供理论指导。方法:采用葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6J WT野生型与CRP完全敲除型小鼠构建UC小鼠模型,通过小鼠表型（体重、结肠长度与脾脏重量）及系列生理生化指标（疾病活动指数、结肠组织病理学、炎症因子表达、肠道黏液层屏障变化）等,评估CRP对UC小鼠的影响,以及通过外加CRP后测定WT野生型UC小鼠表型变化等指标加以确认。从整体、组织和分子三个水平研究CRP对UC小鼠的影响,进一步推断CRP是否直接参与UC进程及可能机制。结果:（1）通过表型和组织病理学评价,发现小鼠口服2%的DSS水溶液一周左右可以诱导UC的发生,成功构建UC小鼠模型（p均＜0.001）;（2）与WT野生型UC小鼠相比,敲除CRP对UC小鼠表型（体重、结肠长度与脾脏重量）、DAI评分、炎症因子表达、黏液层相关蛋白分泌及黏液层厚度均无显著性影响（p均＞0.05）,在HE染色分析结肠组织炎症程度的4次实验中仅有1次结果表明敲除CRP可以促进UC小鼠结肠损伤（p＜0.05）,同样在PAS染色中也仅有1次结果表明敲除CRP后UC小鼠的杯状细胞数量显著减少（p＜0.01）;（3）敲除CRP对UC小鼠没有显著影响,可能是小鼠体内CRP处于较低的表达水平,并且急性期仅有2倍提高,而人急性肠炎中CRP会高调100-500倍,可能预示人体内CRP对UC的介导依赖于较高的作用浓度,因此我们在野生型小鼠中外加高浓度CRP,使小鼠血浆CRP达到人急性期水平。在WT野生型UC小鼠中外加CRP后发现高浓度CRP对小鼠的表型（体重、结肠长度与脾脏重量）亦无显著性影响（p均＞0.05）;（4）考虑到CRP的作用可能会被菌群效果所掩盖,因此尝试了抗生素处理,以排除肠道菌群的干扰,结果表明即便无肠道菌群干扰,WT野生型与CRP完全敲除型UC小鼠的表型（体重、结肠长度与脾脏重量）也无显著性差异（p均＞0.05）;（5）5%高浓度DSS诱导的CRP完全敲除型与WT野生型小鼠的生存率无显著性差异。结论:虽然血液中CRP水平与UC的治愈显著相关,但我们的实验表明CRP似乎并非是UC疾病的直接介导者,更可能是急性肠炎导致炎症因子表达升高,从而促使肝脏分泌更多CRP。我们的结果表明CRP可能仅是UC疾病下游的伴随产物,不具有明显的促炎作用或抑炎作用。但从进化的角度,任何事物的产生都不应该是多余的,考虑到小鼠与人体的巨大差异,对于人体中CRP的准确功能还需今后的进一步研究。
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